[发明专利]水通道蛋白1启动子荧光素酶报告基因的重组与药物筛选应用

摘要

本发明属于生物工程技术领域，具体涉及人类水通道蛋白1(AQP1)启动子荧光素酶报告基因重组及药物筛选的应用。高表达的AQP1在唾液分泌过程中起着重要的作用，且与舍格伦综合征的发病密切相关。在此发明中，我们利用基因工程技术，从人基因组中扩增出了1868bp的AQP1启动子序列，并克隆到PGL2-luc载体上，构建出AQP1启动子-Luc表达载体。AQP1表达受启动子区域的调控，构建涎腺细胞AQP1启动子模型是筛选哪些中药成分能治疗舍格伦综合征的关键步骤。通过此药物筛选细胞模型，证明了一定浓度的人参，西洋参成分可促进AQP1启动子的转录，且浓度越高活性越强，可指导临床应用该药物治疗舍格伦综合征。

主权项

水通道蛋白1启动子荧光素酶报告基因的重组，其特征为：将该基因启动子‑1717至+151序列重组到报告基因载体上。重组的过程为：通过NCBI数据库查找AQP1启动子序列，应用primer premier5.0引物设计软件设计AQP1启动子的引物，采用PCR的方法从人基因组中扩增出了1868bp的AQP1启动子序列，并将其克隆到空载体pGL2‑Basic的多克隆位点中，其下游为荧光素酶(Luc)的表达序列，构建出AQP1启动子‑Luc表达载体。