[发明专利]一种杂交瘤细胞上清阶段微量抗体的筛选方法

摘要

本发明提供一种杂交瘤细胞上清阶段微量抗体的筛选方法，该筛选方法包括如下步骤：上清液预处理、上清液点样及后处理、上清液标记、点样测试、双抗体夹心检测。在杂交瘤法细胞上清阶段微量抗体时首先进行配对筛选，利用芯片的高灵敏及多通量的优点，避免大量的无目的的单抗纯化工作。制备这个种类的单克隆抗体时，可以使用这个方法预先筛选出配对甚至可以预筛临床检测效果好的配对抗体，再进行大规模制备，极大的提高了效率，降低了制备的成本及风险。

主权项

一种杂交瘤细胞上清阶段微量抗体的筛选方法，其特征在于，该筛选方法包括如下步骤： （1）取细胞融合后所形成的杂交瘤细胞的培养上清液，通过盐析法去除杂质后更换缓冲体系，获得预处理上清液； （2）将步骤（1）中得到的预处理上清液中的抗体固定至微透镜阵列芯片； （3）对步骤（2）的微透镜阵列芯片进行阳性反应，确认上清液中抗体活性及在微透镜阵列芯片上的固定情况； （4）将步骤（1）中得到的预处理上清液标记辣根过氧化物酶； （5）使用免疫原及固定上清蛋白芯片对标记上清液分别进行双抗体夹心反应筛选配对情况，然后通过复核、阴性对照确认、天然蛋白验证得出的适合的配对上清。