[发明专利]一种小鼠合体滋养细胞微绒毛膜的制备方法及其应用无效
| 申请号： | 201310162667.7 | 申请日： | 2013-05-06 |
| 公开（公告）号： | CN103230416A | 公开（公告）日： | 2013-08-07 |
| 发明（设计）人： | 韩健;胡炯宇;李怡琳;李力;刘晓洁 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第三军医大学第三附属医院 |
| 主分类号： | A61K35/50 | 分类号： | A61K35/50 |
| 代理公司： | 重庆市恒信知识产权代理有限公司 50102 | 代理人： | 刘小红 |
| 地址： | 400042 重庆市*** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种小鼠合体滋养细胞微绒毛膜的制备方法。该制备方法以小鼠胎盘为原材料，采用机械分离和改良差速离心法将小鼠合体滋养细胞微绒毛膜分离出来并进行富集；采用蛋白浓度定量对其进行浓度检测，并以组织多肽抗原进行鉴定和定量标记。本发明还公开了由所述制备方法制备的小鼠合体滋养细胞微绒毛膜在建立妊娠期高血压疾病小鼠模型中的应用。采用本发明所述制备方法制备的小鼠合体滋养细胞微绒毛膜产量大、浓度高，与人合体滋养细胞微绒毛膜在形态和蛋白标记物方面高度相似；可直接用于以研究子痫前期、子痫等妊娠期高血压疾病的发生、发展机制以及开发对抗药物为目的的医学基础和临床研究，也可以用于进一步制备妊娠期高血压疾病动物模型。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 小鼠 合体 滋养 细胞 绒毛 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种小鼠合体滋养细胞微绒毛膜的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）将新鲜小鼠胎盘采用冰PBS缓冲液洗净后剪碎成胎盘碎片；（2）取步骤（1）所得的胎盘碎片放置在0.1～0.2mol/L的NaCl溶液中，2～6℃振荡过夜，其中所述NaCl溶液中添加了1～2%的青‑链霉素；取上清，差速离心：1000g，10min，弃沉淀；10000g，10min，弃沉淀；100000g，60min，弃上清，得合体滋养细胞微绒毛膜富集沉淀；（3）将步骤（2）所得的合体滋养细胞微绒毛膜富集沉淀以2～6℃的PBS缓冲液洗涤，再以2～6℃的PBS缓冲液重悬，其中所述重悬步骤中PBS缓冲液中含3～7%的蔗糖，保存于‑20℃备用，即得小鼠合体滋养细胞微绒毛膜。
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