[发明专利]建立斑马鱼肠蠕动模型及筛选促胃肠动力药物的方法

摘要

本发明属于药物筛选领域，具体涉及一种斑马鱼肠蠕动模型的建立方法及筛选促胃肠动力药物的方法，包括（1）斑马鱼选取；（2）模型诱导及化合物处理；（3）荧光显微镜定量分析。本发明首次应用一种荧光染料尼罗红来研究胃肠道蠕动情况，这个新的研究方法是对现有研究模型的一大补充，因其可操作性、非侵入性、简单、快捷，此肠蠕动模型对于高通量筛选促胃肠动力化合物有重要价值。

主权项

1.一种斑马鱼肠蠕动模型的建立方法，其特征在于，包括下述步骤：(1)斑马鱼选取选取受精后5天的正常发育斑马鱼，放入微孔板中；(2)荧光染料处理移除微孔板中的养殖用水，设置若干实验组，每个实验组均加入10ng/mL的尼罗红溶液，于28℃恒温孵育16h；(3)移除染料移除微孔板中的荧光染料，清洗三次后，加入养殖用水，接着将微孔板于28℃恒温培养；(4)荧光显微镜定量分析移除微孔板中的液体，加入浓度为0.64mM的甲磺酸麻醉斑马鱼，用3％甲基纤维素胶侧位固定于双凹载玻片上后，接着置于荧光显微镜下对肠道部位进行拍照并保存，再利用图像处理软件进行图像分析，计算肠道荧光强度，促肠蠕动排空率的计算公式如下：对计算结果进行统计学处理，根据统计学处理结果，判断已建立了斑马鱼肠蠕动模型。