[发明专利]一种制备鲆鲽鱼类单个胚胎染色体的方法无效

专利信息
申请号: 201310191707.0 申请日: 2013-05-22
公开(公告)号: CN103267665A 公开(公告)日: 2013-08-28
发明(设计)人: 王旭波;张全启;齐洁;王志刚;于海洋;贺艳 申请(专利权)人: 中国海洋大学
主分类号: G01N1/28 分类号: G01N1/28
代理公司: 江苏银创律师事务所 32242 代理人: 何震花
地址: 266003 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 发明一种制备鲆鲽鱼类单个胚胎染色体的方法,属于生物技术中的海洋动物细胞遗传学领域。使用鲆鲽鱼类的胚胎为材料,先以注射器为工具,采用物理加压的方法对胚胎材料卵膜的破除,将处于尾牙期至出膜期之间的胚胎连同海水一起置于针筒中,然后推动注射器活塞将胚胎自针头处挤压出,胚胎即可破膜,且组织保存较完整。破膜后的胚胎使用常规染色体制备方法进行染色体的制备,用秋水仙素处理2小时,然后置于低渗液中处理30分钟,最后用卡诺固定液固定三次,每次20分钟。本发明获得的鲆鲽鱼类染色体分裂相非常多,效果也很好,尤其是可以制备单个胚胎的染色体,不浪费材料,且可以针对单个个体进行后续的遗传学分析。
搜索关键词: 一种 制备 鱼类 单个 胚胎 染色体 方法
【主权项】:
一种制备鲆鲽鱼类单个胚胎染色体的方法,其特征在于按照下述步骤进行:使用鲆鲽鱼类的胚胎为材料,先以注射器为工具,采用物理加压的方法对胚胎材料卵膜的破除,将处于尾牙期至出膜期之间的胚胎连同海水一起置于针筒中,然后推动注射器活塞将胚胎自针头处挤压出,胚胎即可破膜,且组织保存较完整;破膜后的胚胎使用常规染色体制备方法进行染色体的制备,用质量与体积比为0.005%的秋水仙素处理2小时,然后置于浓度为0.075mol/L KCl的低渗液中处理30分钟,最后用体积比为3:1的乙醇和冰醋酸组成的卡诺固定液固定三次,每次20分钟。
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