[发明专利]一种高纯度藻红蛋白比荧光强度的计算方法有效
申请号: | 201310192095.7 | 申请日: | 2013-05-15 |
公开(公告)号: | CN104165871B | 公开(公告)日: | 2017-04-12 |
发明(设计)人: | 林汝榕;邢炳鹏;蔡文旋;柯秀蓉;张稚兰 | 申请(专利权)人: | 国家海洋局第三海洋研究所 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N21/31 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 361005 *** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 本发明涉及一种高纯度藻红蛋白比荧光强度的计算方法。属于荧光蛋白发光特性技术领域。其特征在于包括下述步骤1)从海洋红藻中分离纯化出藻红蛋白,2)用紫外‑可见光光度计测定获得的藻红蛋白纯化液在280nm、565nm和625nm波长的吸光值,所获得的藻红蛋白纯化液的纯度比值A565/A280应大于4.5;纯度比值A625/A565应小于0.03,3)采用荧光分光光度计,在498nm的激发波长光下,测定藻红蛋白纯化液在576nm波长时发射的荧光强度值A.U,4)采用公式μf=A.U/[(A565/0.1)×Vf]计算藻红蛋白的比荧光强度μf。根据获得的比荧光强度数值可准确、合理地比较任何藻红蛋白样品的荧光性能。 | ||
搜索关键词: | 一种 纯度 蛋白 荧光 强度 计算方法 | ||
【主权项】:
从海洋红藻分离纯化出的一种高纯度藻红蛋白比荧光强度的计算方法,其特征是使用紫外‑可见光光度计测得藻红蛋白纯化液在280nm、565nm和625nm波长的吸光值,藻红蛋白纯化液的纯度比值A565/A280应大于4.5,A625/A565应小于0.03,使用荧光分光光度计、498nm波长的激发光,测得藻红蛋白纯化液在576nm发射波长的荧光强度,采用公式μf=A.U/[(A565/0.1)*Vf]计算藻红蛋白的比荧光强度,式中μf是指比荧光强度,A.U是指使用荧光分光光度计、498nm波长的激发光,测得的藻红蛋白纯化液在576nm发射波长的荧光强度,A565是指使用紫外‑可见光光度计测得的藻红蛋白纯化液在565nm波长的吸光值,Vf是指测定荧光强度时使用的藻红蛋白纯化液的微升数。
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