[发明专利]一种锈斑蟳微卫星分子标记的筛选方法有效
| 申请号： | 201310210311.6 | 申请日： | 2013-05-30 |
| 公开（公告）号： | CN103305610A | 公开（公告）日： | 2013-09-18 |
| 发明（设计）人： | 马洪雨;夏连军;邹雄;马凌波;马春艳;陆建学;蒋伟;李淑娟;刘月星 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院东海水产研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人： | 黄志达 |
| 地址： | 200090 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种锈斑蟳微卫星分子标记的筛选方法，包括：锈斑蟳基因组DNA的提取并稀释备用；设计5’锚定引物及PCR扩增；扩增产物的克隆及测序；序列分析及微卫星特异引物设计；使用引物对锈斑蟳不同个体的基因组DNA进行PCR扩增；使用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测PCR扩增产物；根据扩增产物的不同迁移距离确定每个个体的基因型，从而获得锈斑蟳遗传变异的多态性图谱。本发明操作简单，安全，阳性率高，结果真实可靠，可快速获得锈斑蟳遗传变异的多态性图谱。主要应用于锈斑蟳遗传变异分析及种群遗传多样性研究。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 锈斑 卫星 分子 标记 筛选 方法 | ||
【主权项】：
一种锈斑蟳微卫星分子标记的筛选方法，包括：（1）提取锈斑蟳基因组DNA并稀释备用；（2）设计5’锚定引物及PCR扩增；（3）克隆扩增产物及测序；（4）微卫星分子标记序列分析及微卫星特异引物设计；其中，微卫星分子标记及其对应的特异引物序列如下所示：Cfe‑1标记：如SEQ ID NO:1所示；Cfe‑1标记的特异引物序列：F：ATGCTTGCTATTATTTTCTACTG；R：GAGCAAATTAAGATTGACTGA；Cfe‑2标记：如SEQ ID NO:4所示；Cfe‑2标记的特异引物序列：F：GAGTGGTAATGGGAGCAAATG；R：TCCACATGCTCGTAAAACAAA；Cfe‑3标记：如SEQ ID NO:7所示；Cfe‑3标记的特异引物序列：F：GGGATGTAAGACAATGTGAAC；R：TTATACACCAATCTATATTAATTTC；Cfe‑4标记：如SEQ ID NO:10所示；Cfe‑4标记的特异引物序列：F：ACCAGCCGTAATGCAGAACAC；R：AAAACCCTGAGAAAGGATTGCA；Cfe‑5标记：如SEQ ID NO:13所示；Cfe‑5标记的特异引物序列：F：CTTCCCCTTGGATGACGCTC；R：GACTTAAACTCCCTTTGCTACCTG；（5）使用引物对锈斑蟳不同个体的基因组DNA进行PCR扩增；（6）使用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测PCR扩增产物；（7）根据扩增产物的不同迁移距离确定每个个体的基因型，从而获得锈斑蟳遗传变异的多态性图谱。
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