[发明专利]一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法有效
| 申请号： | 201310213169.0 | 申请日： | 2013-05-31 |
| 公开（公告）号： | CN103314948A | 公开（公告）日： | 2013-09-25 |
| 发明（设计）人： | 刘清华;李军;徐世宏;韩龙江 | 申请（专利权）人： | 中国科学院海洋研究所 |
| 主分类号： | A01N1/02 | 分类号： | A01N1/02 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 周秀梅;李颖 |
| 地址： | 266071*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明属海洋生物技术领域，具体地说是一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法。将星斑川鲽的精液与抗冻液按体积比1:3的比例混合，在0-4℃孵育8-9分钟，孵育后以分段方式降温处理；处理后投入到液氮（-196℃），分装保存。冷冻后精液用自然海水激活，获得复活的冻精活力高于70%。本发明的星斑川鲽精子长期冷冻保存方法对于星斑川鲽人工繁育、种质保存、遗传多样性及可持续养殖等方面有着重要意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 星斑川鲽 精子 超低温 冷冻 保存 方法 | ||
【主权项】：
一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法，其特征在于：将星斑川鲽的精液与抗冻液按体积比1:3的比例混合，在0℃孵育6‑8分钟，孵育后以分段方式降温处理；处理后投入到液氮（‑196℃），分装保存；所述抗冻液由稀释液、抗冻剂和添加剂组成；其中，稀释液为100mM蔗糖，100mM KHCO3，25mM NaHCO3；抗冻剂为终浓度8%的（V/V）DMSO（二甲基亚砜）和终浓度7%的（V/V）Gly（甘油）；添加剂：5mM还原型谷胱甘肽，50mM牛磺酸，10%蛋黄（V/V）。
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