[发明专利]一种测定养血清脑有效成分的方法

摘要

本发明涉及一种药物检测方法，特别涉及一种测定养血清脑有效成分的方法，包括步骤如下（1）样品处理取血浆样品，加入酸溶液和内标溶液中，涡旋混合；之后加入有机溶剂涡旋混合进行液液萃取；上述混合液离心后取有机溶剂层，吹干，然后用流动相复溶后离心，取上清液进样测定；（2）采用液质联用仪进行测定。

主权项

一种测定血浆中养血清脑有效成分的方法，其中有效成分为原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、阿魏酸、迷迭香酸、芍药苷6种，其特征在于，步骤如下：(1)样品处理：取血浆样品1‑3体积，加入0.2‑2体积酸溶液和0.2‑1体积内标溶液，涡旋混合；之后加入10‑50体积有机溶剂涡旋混合进行液液萃取；上述混合液离心后取有机溶剂层，吹干，然后用1‑2体积液相流动相复溶后离心，取上清液进样测定，其中流动相含50％‑90％A相；其中，所述的酸溶液选自，盐酸，0.1‑10％的甲酸或0.01‑0.2％的磷酸；所述的内标溶液是：丹参素、酮洛芬、氯霉素、弗比洛芬中的一种；所述的有机溶剂为：乙酸乙酯，二氯甲烷或3：1体积比的三氯甲烷与正己烷的混合溶剂；(2)采用液质联用仪进行测定：其中液相部分色谱条件：采用反相c18或c8硅胶色谱柱作为分离介质，进样后梯度洗脱，其中，流动相A 0.02‑5％甲酸水、0.02‑5％乙酸水或水，B乙腈或甲醇；梯度洗脱条件：0‑2.5min 10％B、90％A；2.51‑5min 100％B；5.1‑20min 10％B、90％A；流速；0.1‑0.4ml/min；柱温15‑40℃；质谱检测条件：负离子检测模式；喷雾电压：‑2500—‑3500v；毛细管温度：250‑400℃；鞘气：N2 5‑25psi；辅助气：N2 1‑15arb；碰撞气体压力：Ar1.5mTorr；扫描时间：0.1‑1s；采用选择反应监测模式：原儿茶酸离子对m/z153→109或153→91 CE＝10‑30v；绿原酸m/z353→191或353→85 CE＝10‑40v；咖啡酸m/z179→135或179→108 CE＝10‑45v；阿魏酸m/z193→134或193→178 CE＝5‑30v；迷迭香酸m/z 359→161或359→197或133 CE＝10‑50V；芍药苷m/z525→449或525→121 CE＝10‑30V；氯霉素m/z321→152 CE＝10‑40V。