[发明专利]一种贴壁细胞的计数方法无效
申请号: | 201310230189.9 | 申请日: | 2013-06-09 |
公开(公告)号: | CN103266162A | 公开(公告)日: | 2013-08-28 |
发明(设计)人: | 王学健;张秀荣;赵廷坤;房春燕;王兵;马文泉;徐文方 | 申请(专利权)人: | 王学健 |
主分类号: | C12Q1/06 | 分类号: | C12Q1/06 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 261061 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种贴壁细胞的计数方法。本发明通过荧光染料对细胞核进行染色,然后通过荧光显微镜对细胞拍照后,获得图像信息,再经由图像处理完成细胞计数。本发明的方法对实验室硬件的要求很低,仅需倒置荧光显微镜即可。该方法仅用于单层、贴壁生长的细胞的计数,对重叠生长的细胞无效。如果不绘制标准曲线只能得到各组之间相对细胞数,配合标准曲线可以得到各组细胞的绝对数量。该方法在检测细胞增殖的领域,如抗肿瘤化合物活性评价等,可以广泛应用。 | ||
搜索关键词: | 一种 细胞 计数 方法 | ||
【主权项】:
一种贴壁细胞的计数方法,所述方法使用倒置荧光显微镜对细胞培养板进行拍照,基于图像分析进行细胞计数,所述方法包括以下步骤(以96孔板培养细胞为例):(1)吸掉孔内培养基,用100μl乙醇固定10min(2)固定结束后,加入PBS稀释的DAPI 100μl至1μg/ml,对细胞核进行标记(3)5min后用倒置荧光显微镜拍照,以10倍物镜拍孔内的上、下、左、右、中五个视野(4)用图像分析软件对细胞核进行计数,以细胞核的数量反应细胞数。
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