[发明专利]鼠尾椎间盘体外三维胶立体培养方法在审
| 申请号： | 201310241689.2 | 申请日： | 2013-06-18 |
| 公开（公告）号： | CN104232562A | 公开（公告）日： | 2014-12-24 |
| 发明（设计）人： | 李晨光;王拥军;赵永见;施杞;杨燕萍;牛凯 | 申请（专利权）人： | 上海中医药大学附属龙华医院 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 上海浦一知识产权代理有限公司 31211 | 代理人： | 潘诗孟 |
| 地址： | 200032 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种鼠尾椎间盘体外三维胶立体培养方法，用PBS配制浓度为2wt%的琼脂糖凝胶，与含10wt%FBS的DMEM培养液按体积比1：1混合形成三维培养胶；将从活体C57品系小鼠上剪切下来的鼠尾立即消毒并剥皮后投入PBS中清洗；在体视学显微镜下，剥除椎旁韧带显露椎间盘，沿上下软骨终板完整的切下椎间盘，用PBS清洗；将前述三维培养胶铺平培养皿，将椎间盘快速种植入三维培养胶内，待凝固后再加入含10wt%FBS的DMEM培养液覆盖表面，放入培养箱内，每天更换含10wt%FBS的DMEM培养液一次。本发明适用于椎间盘组织工程学，椎间盘移植术以及药物防治椎间盘退变等多方面的研究。 | ||
| 搜索关键词： | 尾椎 体外 三维 立体 培养 方法 | ||
【主权项】：
一种鼠尾椎间盘体外三维胶立体培养方法，其特征是，包括如下步骤：用磷酸盐缓冲液PBS配制浓度为2wt%的琼脂糖凝胶，与含10wt%胎牛血清FBS的细胞培养基DMEM培养液按体积比1：1混合形成三维培养胶；将从活体C57品系小鼠上剪切下来的鼠尾立即消毒并剥皮后投入PBS中清洗；在体视学显微镜下，剥除椎旁韧带显露椎间盘，沿上下软骨终板完整的切下椎间盘，用PBS清洗；将前述三维培养胶铺平培养皿，将椎间盘快速种植入三维培养胶内，待凝固后再加入含10wt%FBS的DMEM培养液覆盖表面，放入培养箱内，每天更换含10wt%FBS的DMEM培养液一次。
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