[发明专利]一种快速制备植物富含亮氨酸的单跨膜受体蛋白激酶多克隆抗体的方法和应用

摘要

本发明公开了一种利用蛋白体外原核表达纯化技术高效且快速地制备植物富含亮氨酸的单跨膜受体蛋白激酶多克隆抗体的方法及应用。该方法制备过程包括：将编码植物蛋白的基因插入到表达质粒pET-30a上，然后转化到大肠杆菌BL21中表达目的蛋白，经过亲合纯化得到纯化的高浓度的蛋白，并用纯化后的蛋白做抗原去免疫兔子，并用不完全福氏佐剂加强，得到植物抗体，取血得到相应的血清，并经过抗体纯化得到纯化的具有一定OD值得抗体溶液。以本发明的制备方法制备出来的多表位抗体可以在蛋白识别，纯化，免疫沉淀，定量定性分析，以及免疫荧光和免疫电镜等很多实验及生产中可以得到广泛应用。

主权项

一种原核表达的重组质粒载体，其特征在于，该载体含有拟南芥富含亮氨酸的单跨膜受体蛋白激酶基因LRR‑RLK的胞外区和胞内区序列，是在原核表达载体pET‑30a的多克隆位点BamHI/XhoI和EcoRI/XhoI分别插入SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示序列而获得。