[发明专利]一种从座壳孢菌中提取17(21)-藿烯-12β-醇的方法

摘要

本发明公开一种从座壳孢菌中提取17(21)-藿烯-12β-醇的方法。所述方法包括代谢产物提取和分离纯化，即冷浸提取、浓缩得粗提物，粗提物过160-200目硅胶柱，正己烷：乙酸乙酯梯度洗脱，再过200-300目硅胶柱，用石油醚：乙酸乙酯梯度洗脱，最后利用重结晶得到座壳孢菌中的17(21)-藿烯-12β-醇。本发明的方法取材方便、过程简单、易操作、成本低、纯度高。

主权项

本发明公开一种从座壳孢菌中提取17(21)‑藿烯‑12β‑醇的方法，其特征包括以下步骤：1）初级、次级培养：座壳孢菌活化后，取菌块接种到摇瓶培养基中，在120~200 r/min、20~28℃条件下连续培养5~10天即初级培养，按8％~10％接种量再次转接到摇瓶培养基中，在20~28℃条件下静止培养35~40天即次级代谢产物。2）冷浸提取：菌液和菌丝体过滤分离，菌丝体在3℃～10℃的有机溶剂中浸泡48～72小时，过滤得浸泡液，旋蒸温度控制在35℃～40℃得浸膏，回收有机溶剂。3）摇瓶萃取：加水溶解浸膏，水与浸膏重量比为50:1～100:1，将水溶物倒入分液漏斗中，加入1～2倍的乙酸乙酯摇瓶萃取，摇30分钟，静止30分钟，再摇30分钟，静止30分钟，待分成后取乙酸乙酯部分，旋转浓缩得粗提物。4）分离纯化：粗提物上160～200目硅胶柱，以正己烷：乙酸乙酯梯度洗脱，收集正己烷：乙酸乙酯体积比=10:1部分洗脱液，旋蒸浓缩得粗提物A，将粗提物A上200～300目硅胶柱，以石油醚：丙酮梯度洗脱，收集石油醚：丙酮体积比=15：1部分洗脱液，得白色含晶体的物质，再将白色含晶体的物质用氯仿溶解，放在4℃冰箱里自然挥干，最后经甲醇重结晶得17(21)‑藿烯‑12β‑醇。