[发明专利]轮状病毒的环介导等温扩增检测引物组及试剂盒和检测方法

摘要

本发明公开了轮状病毒的环介导等温扩增检测引物组及试剂盒和检测方法，其中检测引物组包括上游外引物F3、下游外引物B3、上游内引物FIP、下游内引物BIP，分别如SEQ ID NO.1、2、3和4所示。本发明的LAMP检测方法采用4条LAMP特异性引物及BstDNA聚合酶为等主要成分构成的LAMP反应液，建立的猪轮状病毒环介导等温扩增快速检测方法，可提高临床诊断的速度和准确性，且操作简单，成本低廉，适合基层使用，能有效诊断该病原引起的猪轮状病毒感染，该病得以控制后，将显著提高生猪出栏率、降低生猪死亡率，提高生猪产业的经济效益。

主权项

基于轮状病毒的环介导等温扩增检测引物组的检测试剂盒，其特征在于：所述轮状病毒的环介导等温扩增检测引物组由下列引物组成；上游引物F3：5′‑ACCATTCCTTAACGCACAA‑3′；下游引物B3：5′‑GGCAACATCAGCATAGTCTT‑3′；上游内引物FIP：5′‑CAAGCACAAAGTCGAAGTTAGAAATAAATCTTCCAATTACTGGGTC‑3′；下游内引物BIP：5′‑CTGAAGCTGCAACAGAAATAAACGATCCTGTTGGCCATCCT‑3′；所述试剂盒包括RNA提取试剂、RNA逆转录试剂和环介导等温扩增反应试剂和显色试剂，所述环介导等温扩增反应试剂包括环介导等温扩增反应液和Bst DNA聚合酶，所述环介导等温扩增反应液由以下的组分组成：10μmol/L的上游引物F3、10μmol/L的下游引物B3、10μmol/L的上游内引物FIP、10μmol/L的下游内引物BIP、5mol/L Betaine、100mmol/L MgS04、1.6mmol/L dNTPs、10×Thermo pol反应缓冲液。