[发明专利]一种耐盐碱细菌藤黄微球菌TJTB70降解多环芳烃蒽的方法

摘要

本发明提供了一种耐盐碱细菌藤黄微球菌菌株（Micrococcusluteus）TJTB70（菌种保藏号：CGMCC No.7584）降解蒽的方法，属于微生物降解多环芳烃（PAHs）的应用领域。它解决了现有的微生物降解方法不能解决PAHs中三环化合物蒽的降解修复问题。本耐盐碱菌株降解土壤中蒽的方法，包括以下步骤：（1）耐盐碱菌液的培养和制备；（2）外加碳源优化降解；（3）降解产物的检测方法。本方法工艺流程简单，成本较低，应用范围和使用条件较广，培养的耐盐碱细菌对土壤中蒽具有较强的降解能力。

主权项

1.一种降解蒽的耐盐碱细菌藤黄微球菌菌株（Micrococcusluteus）TJTB70（菌种保藏号：CGMCCNo.7584）降解蒽的方法，其特征在于该方法的具体步骤如下：第1、降解蒽的藤黄微球菌菌液的培养和制备以BH为基础培养基，添加蒽的量为25μg/L，在30℃、150rpm振荡培养5天，然后用流式细胞仪检测微生物藤黄微球菌生长状况；降解蒽的菌株最佳耐盐碱生长条件是：pH=8，NaCl的浓度为8.5%；BH培养基组成以g/L计为：可溶性淀粉10、酵母粉5、蛋白胨5、K₂HPO₄1、Mg₂SO₄7H₂O0.2、Na₂CO₃5、NaCl50；第2、接种和降解蒽以BH为基础培养基，添加蒽的量为50μg/L，以步骤1中的箘液为菌种原液，接种浓度为10⁴~10⁵count/mL；放入摇床中培养降解，培养条件：温度为30℃，转速为150r/min；第3、降解过程中藤黄微球菌的生长情况测定利用流式细胞仪检测细菌数量变化，仪器电压设置SSC=200，FL1=280，FL3=550，speed=3；用超纯水适当稀释样品以保证测定过程中流式细胞仪计数速度小于500cells/s；第4、蒽降解产物的检测利用安捷伦ThermoDSQⅡ气相色谱-质谱联用仪对蒽讲解情况进行分析，采用DB-5石英毛细管柱；进样口温度220℃，传输线温度260℃，EI离子源260℃；气体为高纯氦气；进样量1μL，不分流进样；全扫描质量范围：50-210amu；柱温在70℃保留4min，再以10℃min^-1的速率升到150℃，保留2min，最后以6℃min^-1的速度升至260℃，保持15min。