[发明专利]一种玉米源辅助增强记忆肽及其制备方法

摘要

本发明属于玉米精深加工及其副产物综合利用的技术领域，公开了一种玉米源辅助增强记忆肽及其制备方法，重点解决了以玉米蛋白粉为原料，设计出酶解、超滤、稳态化处理、增效处理、真空旋转浓缩和真空冷冻干燥等工艺路线，制备玉米源辅助增强记忆肽；以动物行为学实验水迷宫、穿梭箱、爬杆、探洞和跳台实验的结果为衡量指标，优选出酶解技术、稳态化技术和增效技术的最佳工艺参数，实现了受试小鼠实验组相比对照组，其实验结果优势显著性提高（P＜0.01）。本发明旨在深入研发玉米加工副产物的生物学功能，提升玉米资源综合利用水平，及加快玉米精深加工系列产品的开发进程。

主权项

一种玉米源辅助增强记忆肽的制备方法，其特征在于，以蛋白质含量为66%的玉米蛋白粉为原料，包括干燥、超微粉碎、酶解、离心、超滤、稳态化处理、增效处理、真空旋转浓缩、真空冷冻干燥过程制备获得玉米源辅助增强记忆肽；1）所述的干燥过程，是将蛋白质含量为66%的玉米蛋白粉置于干燥箱内进行除水干燥，干燥温度控制在35～50℃，干燥时间控制在6～12h，直至玉米蛋白粉的水分含量为1.0～2.0%时，终止干燥过程；2）所述的超微粉碎过程，是利用超微粉碎机将干燥后的玉米蛋白粉进行粉碎，粉碎筛网规格要求为100～200目，收集玉米蛋白超微粉，迅速密封备用；3）所述的酶解过程，是选择纯净水、去离子水、渗透水和蒸馏水中的任意一种，将100～200目的玉米蛋白超微粉调至底物蛋白浓度为1～6%（W/W）；用高速分散均质机进行均一化处理，调控转速为2000～4000r/min，处理时间为0～20min；再置于80～97℃的水浴锅中加热变性5～30min，冷却后控制酶解温度为40～65℃，调节pH值为6.5～10.5，按[E]/[S]为2～12%（W/W）加入碱性蛋白酶，要求酶活范围为100万～140万u/g，用1M的NaOH控制料液的pH值变化在±0.04内，控制酶解时间为2～5h，将酶解液在80～97℃的水浴锅中加热灭酶5～15min；4）所述的离心过程，是将酶解液进行离心处理，离心温度为2～10℃、转速为6000～12000×g、离心时间为5～30min，收集酶解上清液备用；5）所述的超滤过程，是将酶解上清液进行超滤处理，先用NaOH和蒸馏水分别对截流量为30kDa、10kDa、3kDa和1kDa的超滤膜进行清洗，控制NaOH浓度为0.01～0.15M、NaOH温度为10～45℃、NaOH清洗时间为1～2h，控制蒸馏水的温度为10～45℃、清洗时间为1～3h，控制NaOH和蒸馏水的膜面流速均为2.0～4.5mL/min，压力均为5～30pis；再依次选用截流量为30kDa、10kDa、3kDa和1kDa的超滤膜进行超滤，料液温度为5～20℃、膜面流速为2.0～4.5mL/min、压力为5～30pis，最后收集分子量小于1kDa的酶解上清液备用；6）所述的稳态化处理过程，是在每100mL分子量小于1kDa的酶解上清液中，添加浓度为0.2～0.8g/mL、体积为5～10mL的NaCl溶液，再添加浓 度为5～30mg/mL、体积为0.5～2mL的Fe2+、K+、Zn2+、Ca2+和Mg2+中的任意一种金属离子溶液；7）所述的增效处理过程，是在每100mL分子量小于1kDa的酶解上清液中，添加浓度为0.1～0.5g/mL、体积为5～10mL的麦芽糖溶液，再添加浓度为0.01～0.1g/mL、体积为1～5mL的柠檬酸溶液；8）所述的真空旋转浓缩过程，是用真空旋转浓缩仪处理经稳态增效后的酶解上清液，控制转速为1000～1500rpm，浓缩温度为50～70℃，最终浓缩至初始体积的1/5～1/10；9）所述的真空冷冻干燥过程，是将真空旋转浓缩后的酶解上清液分装于冷冻盘中进行预冻，控制液面厚度在3～5mm，温度为‑30～‑20℃，预冻时间为2～5h，然后再置于真空冷冻干燥机内，控制真空度在10Pa以下，冷冻干燥时间为9～13h，即可获得含水量为2.1%的玉米源辅助增强记忆肽。