[发明专利]一种利用黄杆菌高效生产维生素K2的方法无效
| 申请号： | 201310280268.0 | 申请日： | 2013-07-04 |
| 公开（公告）号： | CN103290077A | 公开（公告）日： | 2013-09-11 |
| 发明（设计）人： | 郑之明;刘艳;王鹏;王丽;赵根海;贡国鸿;刘会;宋均营 | 申请（专利权）人： | 中国科学院合肥物质科学研究院 |
| 主分类号： | C12P7/66 | 分类号： | C12P7/66;C12R1/20 |
| 代理公司： | 安徽汇朴律师事务所 34116 | 代理人： | 胡敏 |
| 地址： | 230000 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用黄杆菌高效生产维生素K2的方法。将黄杆菌原始菌株在培养基上活化后，采用低能离子束及低温等离子体复合诱变方式选育高产菌株，经过含维生素K2类似物平板初筛及摇瓶发酵复筛后，高产菌株发酵单位提高50～100%；在黄杆菌发酵过程中通过添加表面活性剂，使胞内维生素K2溶至胞外，维生素K2产量提高50～200%。本发明能够能够极大的提高维生素K2发酵水平，实现高效生物合成维生素K2，为实现维生素K2的大规模工业化发酵提供了可能，使用方便。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 杆菌 高效 生产 维生素 k2 方法 | ||
【主权项】：
一种利用黄杆菌高效生产维生素K2的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将黄杆菌原始菌株在培养基上活化；（2）将黄杆菌菌液涂布于无菌平皿上，风干，进行N+或Ar+离子注入，洗脱后移至含维生素K2类似物的初筛平板培养基上培养，挑选生长旺盛菌落，作为初筛菌落，将初筛菌落转接摇瓶发酵培养基中发酵，挑选维生素K2产量高菌株作为复筛结果，并移至斜面培养基保藏；（3）将上述高产菌株菌液，涂布于无菌平皿上，风干，进行低温等离子体照射，洗脱后移至初筛平板培养基上培养，挑选生长旺盛菌落，作为初筛菌落，将初筛菌落转接摇瓶发酵培养基中发酵，挑选维生素K2产量高菌株作为复筛结果，并移至斜面培养基保藏，重复步骤2～4次，获得维生素K2高产黄杆菌，发酵单位提高50～100%；（4）将黄杆菌菌株接入种子培养基中培养，按接种量5～10%接入发酵培养基，在发酵培养基中添加0.1～5%表面活性剂，在30～37℃培养3天，胞内维生素K2溶至胞外，维生素K2产量提高50～200%。
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