[发明专利]测定微生物制剂降低烟叶中蛋白质含量的作用因子的方法有效
| 申请号： | 201310280585.2 | 申请日： | 2013-07-05 |
| 公开（公告）号： | CN103308627A | 公开（公告）日： | 2013-09-18 |
| 发明（设计）人： | 赵敏;汪长国;戴亚;李宁;寇明钰;吴艳;刘一兵;曾代龙;杨军;雷金山;贾玉红;胡希;杨振;廖占和 | 申请（专利权）人： | 川渝中烟工业有限责任公司 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 成都信博专利代理有限责任公司 51200 | 代理人： | 卓仲阳 |
| 地址： | 610017 四川省成都市龙泉*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开一种测定微生物制剂降低烟叶中蛋白质含量的作用因子的方法，提取微生物的代谢产物，进行SDS-PAGE或双向电泳后切取胶带或挖点酶解，对酶解胶带或胶点进行LC-MS/MS分析；通过多个对比处理，将处理的烟叶进行芯片杂交，测定与植物防御应答、激素代谢、细胞周期调控和酶调控有关的基因上调表达和基因下调表达。本发明的有益效果是能从分子水平分析微生物制剂何种代谢成分降解烟草中蛋白质以及喷施制剂后烟叶在基因水平上的变化，能更全面清晰的解释微生物制剂降解烟叶中蛋白质的机理，为生物制剂的进一步应用打下理论基础。 | ||
| 搜索关键词： | 测定 微生物 制剂 降低 烟叶 蛋白质 含量 作用 因子 方法 | ||
【主权项】：
一种测定微生物制剂降低烟叶中蛋白质含量的作用因子的方法，其特征在于，其测定步骤如下：a）将分离筛选的微生物接种培养基，振荡培养后取菌液离心，将上清液过滤，得到代谢产物；b）对微生物的代谢产物进行SDS‑聚丙烯酰胺凝胶电泳或双向电泳，再切取胶带或挖点酶解；c）对胶带或胶点进行液相色谱串联质谱法分析；d）对性质相同的不同烟叶分别用微生物制剂上清液、微生物制剂菌体、微生物制剂菌液和水进行处理，e）对上述经过处理的烟叶进行芯片杂交，测定与植物防御应答、激素代谢、细胞周期调控和酶调控有关的基因上调表达和基因下调表达。
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