[发明专利]一种产磷脂酶C的重组大肠杆菌及制备磷脂酶C的方法和应用有效
| 申请号： | 201310283434.2 | 申请日： | 2013-07-07 |
| 公开（公告）号： | CN103509748A | 公开（公告）日： | 2014-01-15 |
| 发明（设计）人： | 常明;梁丽;刘睿杰;金青哲;王兴国;刘元法 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12N9/16;C12N15/55;C11B3/00;C11B3/04;C12R1/19 |
| 代理公司： | 无锡互维知识产权代理有限公司 32236 | 代理人： | 王爱伟 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种产磷脂酶C的重组大肠杆菌及制备磷脂酶C的方法和应用，其步骤为：A、磷脂酶C基因的制备：PCR引物的设计及磷脂酶C基因片段的扩增。B、重组质粒的构建：经EcoR I和Not I酶切得大小为1158bp的磷脂酶C基因片段，将其克隆到高拷贝质粒pET28a上，得到重组质粒pET28a-P.f-PLC；C、工程菌的构建：用转化方法将质粒pET28a-P.f-PLC导入到E.coil BL21(DE3)。液体发酵能产生有活力的磷脂酶C，胞内外酶活力可达408.5U/ml。在油脂精炼、磷脂改性、医疗等领域具有一定的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 磷脂酶 重组 大肠杆菌 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种产磷脂酶C的重组大肠杆菌(Eschierichia coil)BL21(DE3)‑pET‑P.f‑PLC，保藏编号为CCTCC No.M2013299。
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