[发明专利]人源性尖吻蝮蛇蛇毒免疫ScFv抗体库及其构建方法

摘要

本发明涉及抗体工程医学，特别涉及噬菌体抗体展示技术，为人源性尖吻蝮蛇蛇毒免疫ScFv抗体库的构建方法，选用人特异性IgG轻链和重链引物进行PCR扩增，得PCR产物，将所得的全部PCR产物进行混合，分别得轻链和重链PCR混合产物，并以此为模板，涉及特异性引物，进行PCR扩增，得Linker-VL片段和VH-Linker片段；将所得Linker-VL片段和所得VH-Linker片段连接，得VH-Linker-VL片段；将所得VH-Linker-VL片段导入噬菌体克隆载体，得人源性尖吻蝮蛇蛇毒免疫ScFv抗体库的原始库。

主权项

人源性尖吻蝮蛇蛇毒免疫ScFv抗体库的构建方法，其特征在于，具体包括以下步骤：A人特异性IgG轻链PCR扩增选用人特异性IgG轻链λ型的特异性引物进行PCR扩增，得λ型的PCR产物，选用人特异性IgG轻链κ型的特异性引物进行PCR扩增，得κ型的PCR产物；B人特异性IgG的γ类重链PCR扩增选用人特异性IgG的γ类重链的特异性引物进行PCR扩增，得重链PCR产物；C轻链基因库的构建将步骤A所得的各个λ型的PCR产物和各个κ型的PCR产物与噬菌体酶切后连接入转化体细菌，得轻链基因库；D人源性尖吻蝮蛇毒毒素免疫噬菌体ScFv抗体库的构建将步骤B所得的重链PCR产物与步骤C所得轻链基因库质粒酶切后进行连接，转入转化体细菌，得人源性尖吻蝮蛇毒毒素免疫噬菌体ScFv抗体库。