[发明专利]定量检测microRNA的PCR分析方法有效
申请号: | 201310291939.3 | 申请日: | 2013-07-12 |
公开(公告)号: | CN103320519A | 公开(公告)日: | 2013-09-25 |
发明(设计)人: | 叶邦策;尹斌成;于翠媛 | 申请(专利权)人: | 华东理工大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 上海新天专利代理有限公司 31213 | 代理人: | 俞滢 |
地址: | 200237 上海市徐汇区梅陇路1*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于碱基堆积杂交原理的定量检测microRNA的PCR分析方法,包括以下步骤:利用靶标microRNA与DNA扩增模板结合后,通过碱基堆积杂交作用稳定了正向引物与DNA扩增模板的结合,在DNA聚合酶作用下延伸正向引物,在与反向引物共同作用下,引发PCR反应,得到双链DNA,染料SYBR Green I与双链DNA结合产生荧光信号,实时测定反应体系中的荧光信号强度,与标准工作曲线对比,计算出靶标microRNA的浓度。该方法具有灵敏度高、特异性强、操作简单、成本低等特点,可广泛应用于组织,血液或细胞的生物样本中microRNA检测。 | ||
搜索关键词: | 定量 检测 microrna pcr 分析 方法 | ||
【主权项】:
一种定量检测microRNA的PCR分析方法,其特征在于,包括以下步骤:利用靶标microRNA与DNA扩增模板结合后,通过碱基堆积杂交作用稳定了正向引物与DNA扩增模板的结合,在DNA聚合酶作用下延伸正向引物,在与反向引物共同作用下,引发PCR反应,得到双链DNA,染料SYBR Green I与双链DNA结合产生荧光信号,实时测定反应体系中的荧光信号强度,与标准工作曲线对比,计算出靶标microRNA的浓度。
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