[发明专利]提高截短侧耳素产量的方法有效

专利信息
申请号: 201310294509.7 申请日: 2013-07-12
公开(公告)号: CN104278044B 公开(公告)日: 2017-10-13
发明(设计)人: 李平作;王莉;郅晓乐;叶晴;赵国屏 申请(专利权)人: 中国科学院上海生命科学研究院
主分类号: C12N15/53 分类号: C12N15/53;C12N15/63;C07C69/675
代理公司: 上海一平知识产权代理有限公司31266 代理人: 祝莲君,刘真真
地址: 200031 *** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明提供了提高截短侧耳素产量的方法。具体地,本发明提供了一种改良截短侧耳素生产菌株的方法,该方法适用范围广,效率高。本发明还提供了一种经改良的截短侧耳素生产菌株。由于采用新颖的经改良的截短侧耳素生产菌,因此可大幅提高截短侧耳素产量。此外,本发明还提供了一种截短侧耳素的生产方法,由于该生产方法对现有生产工艺可不进行修改和调整,因此成本低。
搜索关键词: 提高 侧耳 产量 方法
【主权项】:
一种基因工程细胞,其特征在于,所述细胞的基因组中整合有构建物;或者所述细胞的基因组中整合有(a)用于表达外源酮基还原酶(KR)的第一表达盒和(b)用于表达外源葡萄糖脱氢酶(GDH)的第二表达盒,其中所述的第一表达盒包括第一启动子、与所述第一启动子可操作地连接的酮基还原酶的编码序列、和终止密码子;所述的第二表达盒包括第二启动子、与所述第二启动子可操作地连接的葡萄糖脱氢酶(GDH)的编码序列、和终止密码子,并且所述的细胞是生产截短侧耳素的工程菌,所述构建物包括:(a)用于生产外源酮基还原酶(KR)的第一亚构建物,其中所述的第一亚构建物包括第一启动子、与所述第一启动子可操作地连接的酮基还原酶的编码序列、和终止密码子;(b)用于生产外源葡萄糖脱氢酶(GDH)的第二亚构建物,其中所述的第二亚构建物包括第二启动子、与所述第二启动子可操作地连接的葡萄糖脱氢酶(GDH)的编码序列、和终止密码子,其中所述的第一亚构建物和第二亚构建物是相互独立的、或是一体的;其中,所述的酮基还原酶选自下组:来源于酿酒酵母的戊二酰单酰辅酶A还原酶(HMGR);来源于黑曲霉的戊二酰单酰辅酶A还原酶(HMGR);来源于紫杉的戊二酰单酰辅酶A还原酶(HMGR);来源于双孢蘑菇的戊二酰单酰辅酶A还原酶(HMGR);来源于肠膜明串珠菌亚种J18(Leuconostoc mesenteroides subsp.mesenteroides Strain J18)的戊二酰单酰辅酶A还原酶(HMGR)。
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