[发明专利]一种奉节脐橙真伪鉴定与品质评价的方法

摘要

本发明涉及一种奉节脐橙真伪鉴定与品质评价的方法。它是按照以下步骤进行的：（1）取样；（2）供试品溶液制备；（3）HPLC分析；（4）真伪鉴定与品质评价。本发明方法根据奉节脐橙果实中的特征性活性成分黄酮的组成与相对含量为特征，将奉节脐橙作为一个整体对待，构建了奉节脐橙黄酮类特征性成分色谱指纹图谱，并以此为参照实现了对市售的脐橙品种进行质量检测、监控和品质评价，有利于奉节脐橙果实真伪、产地和品质的鉴定和控制，克服了仅凭产区、果形指数和口感特征进行鉴定准确性差的不足，为解决我国地方优质甜橙品种质量混杂的问题提供了可靠依据。

主权项

一种奉节脐橙真伪鉴定与品质评价的方法，其特征在于，它是按照以下步骤进行的：（1）取样：样品分别来自奉节脐橙地理标志产品保护区20个乡镇中的至少10个产区，于成熟期，选生长势中等、生态条件和树形基本一致的枳砧奉园72‑1芽接五龄成年植株随机采样；每样选5株，每株自树冠中部外围随机采集成熟果实5枚，按产地分类混合后于‑4℃低温贮存；（2）供试品溶液制备：各类试样随机选取各3个，剥取果皮和囊瓣，45℃烘至恒重，分别取试样果皮及果肉囊瓣干样，粉碎10 min，过80目筛，得供试样粉；精确称取0.2 g样粉，加入甲醇20 mL后，240 W超声处理30 min，收集上清液后再加20 mL甲醇240 W超声处理30 min，合并上清液，于5000 r/min离心10 min，减压回收溶剂，甲醇定容至10 mL，0.22 μm微孔滤膜过滤，得供试品溶液；（3）HPLC分析：采用岛津SIL‑20A自动进样器精密吸取10 μL供试品溶液自动进样，后采用岛津LC‑20AD型HPLC仪检测，色谱条件如下：色谱柱为迪马Diamonsil C18柱，规格为250 mm×4.6 mm，5 μm；流动相为乙腈‑0.2%乙酸水溶液流动系统；流速1 mL•min‑1，DAD检测器290 nm检测，检测时间为35 min，柱温箱为30℃；利用夹角余弦法进行各色谱图之间相似度计算，同时利用国家药典委中药色谱指纹图谱相似度评价软件对供试品溶液HPLC检测数据经LC‑solution色谱工作站导出AIA（*.cdf）格式文件进行共有成分峰匹配、对照谱图生成及相似度计算，分别建立奉节脐橙果皮与果肉中的黄酮类成分共有特征性HPLC色谱指纹图谱；（4）真伪鉴定与品质评价：以已构建的奉节脐橙果皮与果肉中的黄酮类成分共有特征性HPLC色谱指纹图谱为参照，随机抽取市售品种的脐橙，利用步骤（2）中所述的供试品溶液制备方法和步骤（3）中所述的HPLC检测方法，处理随机抽取的市售品种的脐橙，并对其果皮与果肉的色谱数据进行相似度分析，即可实现对该随机抽取市售品种的脐橙进行真伪鉴定与品质评价。