[发明专利]猪瘟、猪蓝耳病、猪传染性胃肠炎病毒检测试剂盒及检测方法

摘要

本发明公开了一种试剂盒，该试剂盒包括一个扩增试剂、一个初筛探针试剂和4个复筛探针试剂。本发明还公开了一种检测猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒欧洲型亚型、猪蓝耳病病毒美洲型亚型和猪传染性胃肠炎病毒的方法。在实际检测中，本发明所提供的试剂盒和方法能够在6小时内完成样品中上述几种病毒的筛查，大量阴性样本可以通过初筛阶段判定为阴性而不进入复筛阶段，可大大提高检测效率，节省大量时间、人力和物力，并且，初筛后的阳性结果待确认样本，可以在复筛过程中通过特异性捕获探针获得相应病毒阳性结果的最终判定确认，同时本发明所提供的方法具有较高灵敏性、特异性，适合于对待测样品的快速筛查。

主权项

一种试剂盒，该试剂盒包括一个扩增试剂、一个初筛探针试剂和4个复筛探针试剂；其中，所述扩增试剂中包括3个引物对：第一对引物对由SEQ ID NO:1所示的引物和SEQ ID NO:2所示的引物组成，第二对引物对由SEQ ID NO:3所示的引物和SEQ ID NO:4所示的引物组成，第三对引物对由SEQ ID NO:5所示的引物和SEQ ID NO:6所示的引物组成，其中，所述初筛探针试剂中包含5个初筛探针，所述5个初筛探针的序列分别为SEQ ID NO:7至SEQ ID NO:11所示的探针；其中，所述4个复筛探针试剂分别含有一个复筛探针对：第一对复筛探针对由SEQ ID NO:12所示的探针和SEQ ID NO:13所示的探针组成，第二对复筛探针对由SEQ ID NO:12所示的探针和SEQ ID NO:14所示的探针组成，第三对复筛探针对由SEQ ID NO:12所示的探针和SEQ ID NO:15所示的探针组成，第四对复筛探针对由SEQ ID NO:12所示的探针和SEQ ID NO:16所示的探针组成，其中，SEQ ID NO:7以及SEQ ID NO:13至SEQ ID NO:16的5’末端标记有生物素分子，SEQ ID NO:8至SEQ ID NO:12的5’末端标记有地高辛分子。