[发明专利]基于一维长柱液相色谱串联质谱的蛋白质组分离鉴定方法有效
| 申请号： | 201310310332.5 | 申请日： | 2013-07-23 |
| 公开（公告）号： | CN103454371A | 公开（公告）日： | 2013-12-18 |
| 发明（设计）人： | 杨芃原;陆豪杰;殷薛飞;刘晓慧;申华莉;晏国全;陈晨 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | G01N30/89 | 分类号： | G01N30/89 |
| 代理公司： | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人： | 吴桂琴 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属生物技术领域，涉及基于一维长柱液相色谱串联质谱的蛋白质组分离鉴定方法。该鉴定方法使用50cm的反相色谱柱，采用一维长梯度对蛋白质组学样品进行分离，经电喷雾电离，串联质谱进行一维蛋白质组分离鉴定，使用结果表明，本鉴定方法的实验操作简单、不需预分馏分，一次实验可达到传统二维分离质谱鉴定的效果；特别是对于少量样品的处理，一次实验仅需几微克样品就可完成一次蛋白质组学的数据分析，所需样品量少,对复杂生物蛋白质组的仪器分析效率达到7小时内实现对4000个以上蛋白质的分析鉴定，实现蛋白质的快速高效鉴定。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 一维长柱液相 色谱 串联 蛋白质 组分 鉴定 方法 | ||
【主权项】：
基于一维长柱液相色谱串联质谱的蛋白质组分离鉴定方法，其特征在于，包括步骤：(1)裂解液从细胞或组织中提取全部蛋白质混合物；(2)蛋白质经沉淀，重悬，进行还原烷基化；(3)采用蛋白酶将待分离鉴定的蛋白质混合物酶解成肽段混合物；(4)将酶解获得的肽段混合物进行一维液相色谱串联质谱鉴定；所述的液相色谱串联质谱中，色谱柱长度为色谱分离柱长度大于40cm，色谱梯度为三步长梯度洗脱。
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