[发明专利]一种利用磷霉素选育达托霉素高产菌株的方法

摘要

本发明公开了一种利用筛选对磷霉素敏感的玫瑰孢链霉菌从而获得达托霉素高产菌株的方法，属于菌种的选育技术。该方法包括以下过程：斜面孢子用无菌水制成孢子悬液，经UV处理后，涂布于分离培养基上，用无菌竹签将长出的菌落挑出接种于含有不同浓度的磷霉素的固体筛选培养基上，选取对不同浓度磷霉素敏感的菌落，接种于斜面培养基上培养，最终进行液体培养，从中选出具有稳定遗传性状的高产菌株。

主权项

一种利用磷霉素选育达托霉素高产菌株的方法，其特征在于包括以下过程：将玫瑰孢链霉菌(Streptomyces roseosporus)亲株的斜面孢子用无菌水制成10⁵‑10⁷个孢子/ml的单孢子悬液，将1‑3ml的孢子悬液分装于玻璃皿中，于15瓦紫外灯下处理0.5‑1.5分钟，然后将辐射处理的孢子悬液用无菌水稀释到10^‑3‑10^‑5后，涂布于培养平板中26‑28℃培养7‑8天，用无菌竹签将长出的菌落挑出接种于含有200‑1000μg/ml的磷霉素的筛选平板上，挑取对相应浓度磷霉素敏感的菌落，于斜面培养基培养6‑7天后，接种于装有30ml液体发酵培养基的250ml摇瓶，于28‑30℃，转速为200‑220rpm的摇床中培养120‑160h，通过HPLC，检测达托霉素产量，从而获得高产的达托霉素产生菌。