[发明专利]一种烟草叶片愈伤组织细胞的冷冻保存方法有效
| 申请号： | 201310315546.1 | 申请日： | 2013-07-24 |
| 公开（公告）号： | CN103355285A | 公开（公告）日： | 2013-10-23 |
| 发明（设计）人： | 余光辉;向文豪;覃永华 | 申请（专利权）人： | 中南民族大学 |
| 主分类号： | A01N3/00 | 分类号： | A01N3/00;C12N5/04 |
| 代理公司： | 武汉华旭知识产权事务所 42214 | 代理人： | 周宗贵;刘荣 |
| 地址： | 430074 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种烟草叶片愈伤组织细胞的冷冻保存方法，包括以下步骤：将烟草叶片愈伤组织细胞在培养基中培养，制得细胞悬浮液；将细胞悬浮液离心并去上清液后，制得细胞液，将细胞液转移至冷冻保藏管中并在其中加入冷冻保护剂后密封；将冷冻保藏管降温至4℃并在此条件下静置20-40分钟，然后继续降温至-20℃并在此温度下静置30-40分钟，继续降温至-40℃并在此温度下静置3-4小时，最后将冷冻保藏管在-80℃的温度下保存。本发明所提供的方法简单易行，冻存后的细胞有较高的存活率，且本方法不需要消耗大量的人力物力，成本低。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 烟草 叶片 组织细胞 冷冻 保存 方法 | ||
【主权项】：
一种烟草叶片愈伤组织细胞的冷冻保存方法，其特征在于包括以下步骤：（1）、将烟草叶片愈伤组织细胞在培养基中培养，制得细胞悬浮液；（2）、将细胞悬浮液离心并去上清液后，制得细胞液，将细胞液转移至冷冻保藏管中并在其中加入冷冻保护剂后密封；（3）、将冷冻保藏管降温至4℃并在此条件下静置20‑40分钟，然后继续降温至‑20℃并在此温度下静置30‑40分钟，继续降温至‑40℃并在此温度下静置3‑4小时，最后将冷冻保藏管在‑80℃的温度下保存。
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