[发明专利]基于磁性分子印迹聚合物放大效应的SPR传感器构建及应用

摘要

一种基于磁性分子印迹聚合物放大效应的表面等离子体共振传感器构建及其在农药检测中的应用，属于表面等离子体共振传感技术领域。它先以毒死蜱为模板分子，利用多巴胺的自聚合性能，合成对毒死蜱具有识别作用的磁性分子印迹聚合物。洗脱毒死蜱后，含有印迹空腔的磁性分子印迹聚合物具有良好的超顺磁性和高选择性，利用固定在金片表面的乙酰胆碱酯酶与毒死蜱之间的特异性相互作用，构建了基于磁性分子印迹聚合物放大效应的农药残留物识别检测传感界面；与传统的农残检测技术相比，本发明构建的基于磁性分子印迹聚合物放大效应的表面等离子体共振传感器对毒死蜱的检测灵敏度高和选择性好，具有很好的应用前景。

主权项

基于磁性分子印迹聚合物放大效应的SPR传感器构建，其特征在于所述构建包括以下步骤：（1）Fe3O4 NPs的制备：将2.35 g FeSO47H2O和4.1 g FeCl36H2O溶解于90 mL水中，室温下迅速加入25 mL质量百分浓度为25%的氨水，溶液由橙色变成黑色，再逐滴加入1 mL油酸，于80 ºC下反应1 h，获得平均粒径为6‑7 nm的Fe3O4 NPs，上述实验过程需在氮气保护下进行；最后，用磁铁将溶液中的Fe3O4 NPs分离出来，于4 °C储存备用；（2）磁性分子印迹聚合物的制备：将50 mg Fe3O4 NPs溶解于20 mL、10 mM、pH 8.0的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲溶液中，加入5mL含1 mg/mL毒死蜱的乙腈溶液，室温下机械搅拌2 h，再加入25 mg多巴胺，室温下继续搅拌4 h；反应产物用磁铁分离出来，用体积比3%醋酸和体积比20%乙腈的混合溶液洗脱印迹的毒死蜱分子和未聚合的多巴胺，直至洗脱液中检测不到毒死蜱的紫外吸收峰；最后，用二次水将醋酸和乙腈清洗干净，即获得含有毒死蜱印迹空腔的磁性分子印迹聚合物；非分子印迹聚合物的制备过程与磁性分子印迹聚合物相似，只是不加入目标分子毒死蜱；（3）SPR传感界面的构建：将金片在体积比7:3的H2SO4:H2O2混合溶液中浸泡2 min，用二次水冲洗干净并用氮气吹干，安装入SPR检测池；向检测池中注入50 μL、1 mM的11‑巯基十一烷酸溶液，反应2 h，用二次水冲洗后，注入50 μL 0.2 M 1‑乙基‑3‑(3‑二甲氨基碳二亚胺)盐酸盐和0.05 M N‑羟基丁二酰亚胺混合溶液反应10 min，再注入50 μL、2 U/mL的乙酰胆碱酯酶溶液反应30 min；最后，注入50 μL、1.0 M的乙醇胺溶液反应10 min，用10 mM、pH 8.5的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲溶液冲洗后，制得乙酰胆碱酯酶功能化的SPR传感界面。