[发明专利]一种含有角质细胞生长因子KGF2的植物油体有效
| 申请号： | 201310333809.1 | 申请日： | 2013-08-04 |
| 公开（公告）号： | CN103468737A | 公开（公告）日： | 2013-12-25 |
| 发明（设计）人： | 姜潮;李校堃;李海燕;田海山;杨晶;王兰;陈玉斌;金立波 | 申请（专利权）人： | 吉林农业大学;吉林农大生物反应器工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/66;C11B1/04 |
| 代理公司： | 长春市东师专利事务所 22202 | 代理人： | 张铁生 |
| 地址： | 130118 吉林省*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种含角质细胞生长因子KGF2的油体，利用重组DNA技术将KGF2基因插入以pCAMBIA1301质粒为基本骨架改造的植物特异表达载体pOBT，构建了植物油体特异表达KGF2植物表达载体pOBT-KGF2，转化至油料作物中，大量表达了角质细胞生长因子KGF2，提取含油体蛋白与KGF2的融合表达产物的油体，可直接作为活性成分用于医药领域和日化领域生产，简化了以往角质细胞生长因子KGF2提取，以及与乳化剂（或保护剂）混合的加工工艺，降低了生产成本。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 含有 角质 细胞 生长因子 kgf2 植物油 | ||
【主权项】：
一种表达载体质粒pOBT‑ KGF2，它是由下述方法制备的：1）以p1301为基本骨架，将其T‑DNA区进行改造，除了保留有T‑DNA区的NOS基因外其余基因均被35S和Bar基因替换，以pEGAD质粒为模板，利用35S‑F上游引物CGGGGTACCATCCGTCAACATGGTGGAGCACGACACGCTTGTCTACT和Bar‑R下游引物CGGAATTCACTAGTTCAGATCTCGGTGACGGGCAGGACCGGACGGGGCGGAACC进行PCR，扩增得到35S‑Bar基因，利用kpnI和SpeI酶切位点将其插入到pCAMBIA1301载体T‑DNA区的NOS基因前，构建了p1301‑35S‑Bar‑NOS基本质粒，简写为pO质粒；2）用pstI和NcoI分别酶切并连接pO质粒和序列表SEQ ID NO.2所示基因，得中间载体pOB；3）用HindⅢ和kpnI分别酶切并连接中间载体pOB和序列表SEQ ID NO.3所示基因，得植物特异表达载体pOBT；4）用NcoI与HindⅢ分别酶切并连接植物特异表达载体pOBT和序列表SEQ ID NO.5所示基因，得表达载体质粒pOBT‑ KGF2。
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