[发明专利]一种快速高效的植物寄生线虫总RNA提取方法及其应用有效

专利信息
申请号: 201310345091.8 申请日: 2013-08-09
公开(公告)号: CN103387977A 公开(公告)日: 2013-11-13
发明(设计)人: 彭德良;王高峰;黄文坤;孔令安;贺文婷;崔江宽 申请(专利权)人: 中国农业科学院植物保护研究所
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 北京兆君联合知识产权代理事务所(普通合伙) 11333 代理人: 胡敬红
地址: 100193 *** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明涉及一种快速高效的植物寄生线虫总RNA提取方法及其应用。植物线虫组织破碎方法,采用如下步骤:(1)制备玻璃粉末:将普通玻璃破碎后收集过60目筛子的粉末,用浓盐酸洗后再用去离子水洗至pH7.0,再高温去除RNA酶;(2)搅拌破碎:于无RNA酶离心管中加入玻璃粉末和TRIzol试剂以及线虫体,用微量电动组织匀浆器搅拌玻璃粉末,直至线虫组织破碎。本发明以自制的玻璃粉末结合TRIzol试剂实现对线虫的快速充分研磨,具有操作简便、无需特殊仪器设备和可靠性高等优点,应用该方法能够提取高质量的总RNA。该方法可在不同实验条件的实验室进行推广应用,在植物线虫分子生物学研究中具有极高的应用价值。
搜索关键词: 一种 快速 高效 植物 寄生 线虫 rna 提取 方法 及其 应用
【主权项】:
植物线虫组织破碎方法,采用如下步骤:(1)制备玻璃粉末:将普通玻璃破碎后收集过60目筛子的粉末,用浓盐酸洗后用去离子水洗,直至pH7.0,再高温去除RNA酶,冷却至室温备用;(2)搅拌破碎:于无RNA酶离心管中加入玻璃粉末和TRIzol试剂以及线虫体,用微量电动组织匀浆器搅拌玻璃粉末,直至线虫组织破碎。
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