[发明专利]肝衰竭预后的GSTM3基因甲基化定量检测法及试剂盒

摘要

肝衰竭预后的GSTM3基因甲基化定量检测法及试剂盒。它是一种定量检测谷胱甘肽S-转移酶M3启动子甲基化程度的方法和装置。试剂盒内设有提取外周血基因组DNA的试剂，对基因组DNA进行修饰的试剂，5×预混PCR反应体系，以及针对目的基因GSTM3启动子的甲基化特异性引物对和Taqman荧光探针、内参基因ALU-C4的特异性引物对和Taqman荧光探针。通过目的基因GSTM3启动子的甲基化特异性引物对和探针、内参基因ALU-C4的特异性引物对和探针，对外周血基因组DNA进行实时定量聚合酶链式（PCR）反应,用定量甲基化特异性PCR的方法检测目的基因GSTM3和内参基因ALU-C4的阈值循环值，并计算出基因GSTM3甲基化定量值。有助于评估病情、判断预后及指导治疗。

主权项

肝衰竭预后的GSTM3基因甲基化定量检测法及试剂盒，其特征在于：盒内设有提取外周血基因组DNA的试剂，对基因组DNA进行重亚硫酸盐修饰的试剂，5×预混PCR反应体系，以及针对目的基因GSTM3启动子的甲基化特异性引物对和Taqman荧光探针、内参基因ALU‑C4的特异性引物对和Taqman荧光探针：GSTM3‑上游引物：5’CGTACGGTTTTGTGGAGTC 3’；GSTM3‑下游引物：5’TCCGAACCTTCGAAAACTAA 3’；GSTM3‑探针: 5’Fam AAACCCACGCGCGAACGCC 3’BHQ1；ALU‑C4‑上游引物：5’GGTTAGGTATAGTGGTTTATATTTGTAATTTTAGTA 3’；ALU‑C4‑下游引物：5’ATTAACTAAACTAATCTTAAACTCCTAACCTCA 3’；ALU‑C4‑探针: 5’Fam CCTACCTTAACCTCCC 3’BHQ1。