[发明专利]一种快速检测血旺中鸡鸭猪血液成分的方法

摘要

本发明公开了一种快速检测血旺中鸡鸭猪血液成分的方法，以血旺为材料，提取DNA，使用TaqMan探针和特异性引物，进行荧光定量PCR反应；应用ABI7500SoftwareSDS1.4对实验结果进行分析处理，以Ct值小于36的扩增作为检测的阳性结果。本发明是一种可以同时检测血旺中鸭血、猪血和鸡血成分的多重TaqMan探针实时荧光PCR法，能够避免非特异性扩增，可以同时鉴别多种动物源性成分，大大提高检测效率和结果的准确性，检测下限为0.15ng，灵敏度达1%，具有良好的特异性，可同时实现对血旺中鸭血、猪血和鸡血DNA成分的检测和定量，为食品中动物源性成分鉴定探索了新的途径，具有很好的实用性。

主权项

一种快速检测血旺中鸡鸭猪血液成分的方法，其特征在于：以血旺为材料，提取DNA，使用TaqMan探针和特异性引物，进行荧光定量PCR反应；应用ABI 7500 Software SDS1.4对实验结果进行分析处理，以Ct值小于36的扩增作为检测的阳性结果；其中，TaqMan探针和特异性引物具体如下：正向引物1：5’‑GGAGCACCTCTATCAGAGAAAGACA‑3’，反向引物1：5’‑GTGTGTAGAGCTCAAGATCAATCCC‑3’，TaqMan探针1：FAM‑TGGGAACAAGCATGAATGTAAGTGGATGGT‑BHQ1；正向引物2：5’‑CGAGAGGCTGCCGTAAAGG‑3’，反向引物2：5’‑TGCAAGGAACACGGCTAAGTG‑3’，TaqMan探针2：CY5‑ACAGTAGGTCTGACGTGACTCCCCGA‑BHQ1；正向引物3：5’‑CAGCTGGCCTGCCGG‑3’，反向引物3：5’‑CCCAGTGGAATGTGGTATTCA‑3’，TaqMan探针3：HEX‑CTGCCAAGCTCTGCCACTCCTCTG‑BHQ1。