[发明专利]一种抗蟾皮转胶蛋白-2重组蛋白的鼠抗血清的制备方法

摘要

一种抗蟾皮转胶蛋白-2重组蛋白的鼠抗血清的制备方法，属于生物医药技术领域。其特征在于：1）将蟾皮转胶蛋白-2重组蛋白与弗氏完全佐剂配置成A剂；蟾皮转胶蛋白-2重组蛋白与弗氏不完全佐剂配置成B剂；2）将小白鼠皮下多点注射A剂，然后正常饲养12-16天，再用B剂皮下注射，以后每隔12-16天注射B剂一次，共注射B剂3-5次；3）将上述处理后小白鼠心脏采血，制得的上清液即为鼠抗血清。上述一种抗蟾皮转胶蛋白-2重组蛋白的鼠抗血清的制备方法，能用于应对和预测转胶蛋白-2抗肿瘤研究中的具体事件，起到提示和标记转胶蛋白-2的作用；其获取方法简便，成本低廉，效果显著。

主权项

一种抗蟾皮转胶蛋白‑2重组蛋白的鼠抗血清的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1）将蟾皮转胶蛋白‑2重组蛋白与弗氏完全佐剂按照1：1的比例混匀，配置成A剂；再将蟾皮转胶蛋白‑2重组蛋白与弗氏不完全佐剂按照1：1的比例混匀，配置成B剂，备用； 2）将小白鼠皮下多点注射45‑100ug的A剂，然后正常饲养12‑16天，再用B剂皮下注射45‑100ug，再正常饲养，以后每隔12‑16天注射B剂一次，共注射B剂3‑5次，备用；3）将上述处理后小白鼠直接心脏采血，所得血液于2‑6℃下静置10‑15h，等血液充分凝聚后，在转速2000‑4000rpm下离心25‑35min，所得上清液即为鼠抗血清，置于‑60‑70℃超低温冰箱保存即可；所述的蟾皮转胶蛋白‑2重组蛋白采用以下方法制备：1）从蟾蜍皮肤cDNA质粒文库筛选，克隆到缺失部分5′‑端开放阅读框碱基序列的蟾皮转胶蛋白‑2重组蛋白 cDNA；2）在原核表达系统一一大肠肝菌中表达和生产蟾皮转胶蛋白‑2重组蛋白: 首先构建工程菌并诱导表达，然后高密度发酵工程菌并诱导表达，包涵体分离和洗涤后，将目的蛋白质复性、纯化。