[发明专利]一种具有免疫活性的大米酶解硒多肽的制备方法

摘要

本发明涉及一种富硒稻米副产品加工领域，特别涉及一种具有免疫活性的大米酶解硒多肽的制备方法。该方法利用富硒大米加工副产物碎米，通过研磨、过筛、脱脂，制成脱脂富硒米粉，用氢氧化钠溶液碱提离心后，收集上清液，用稀盐酸溶液酸沉，离心后取沉淀水洗后冻干。所得大米蛋白用胰蛋白酶酶解后冻干，获得即得硒含量为0.3～0.4mg/kg的大米酶解肽。在细胞免疫功能实验中，大米酶解硒多肽具有良好的促进巨噬细胞增殖和吞噬中性红的能力。本发明的大米硒多肽，营养成分天然，富含微量元素硒，适合用于提高机体免疫功能的食品辅料、营养强化剂或保健食品，制备方法简单、可靠。

主权项

一种具有免疫活性的大米酶解多肽的制备方法，其特征在于包括如下步骤和工艺条件： (1)原料预处理：取新鲜富硒碎米，研磨，过100目筛； (2)脱脂：用正己烷，料液比为1∶3～1∶6，在磁力搅拌器(79‑1，常州国华电器有限公司)上脱脂两次，每次4h，离心，将沉淀放在通风橱中风干一夜； (3)碱提：用浓度为0.05mol/L～0.07mol/L的NaOH溶液，料液比1∶10～1∶20，温度35～45℃，时间2h～3h，碱提2次，离心，合并上清液； (4)酸沉：将所得蛋白质水解液放在磁力搅拌器上，边搅拌边用稀盐酸溶液调节至等电点(4.5～5.0)，待沉淀析出，再离心，水洗2次； (5)冻干：将上述所得蛋白质用培养皿装好放入冰箱，在‑20℃下预冻一夜，第二天放进冷冻干燥机冻干(FD‑1C，西班牙Telstar公司)24小时，取出后装入自封袋； (6)酶解：将上述所得蛋白干粉在胰蛋白酶与底物浓度比1∶8～1∶10，底物浓度50～70g/L，pH8.5～9.0，温度40～50℃的条件下酶解2h～3h，离心收集上清液； (7)冻干：将上述所得酶解液用培养皿装好放入冰箱，在‑20℃下预冻一夜，第二天放进冷冻干燥机冻干24小时，取出后装入自封袋。