[发明专利]一种中药组合物制剂中20种乌头碱类化合物的鉴别方法

摘要

本发明公开了一种中药组合物制剂中20种乌头碱类化合物的鉴别方法，属于药物分析领域，鉴别方法包括以下步骤样品溶液的制备、色谱质谱分析、成分鉴定，使用UPLC/Q‑TOF‑MS/MS对芪苈强心胶囊活性部位中的C19二萜类生物碱进行了检测和鉴定，可以为其物质基础的研究提供有力的佐证。

主权项

一种中药组合物制剂中20种乌头碱类化合物的鉴别方法，所述中药组合物是由以下重量份的原料药制成：黄芪 150‑450份、附子40‑120份、人参或党参75‑225份、丹参75‑225份、葶苈子50‑150份、香加皮或南五加皮60‑180份、泽泻75‑225份、玉竹25‑75份、桂枝30‑90份、红花30‑90份、陈皮25‑75份，该方法采用高效液相色谱法对组合物分离，用质谱对化合物进行鉴别，其特征在于所述鉴别方法包括以下步骤：A、样品溶液的制备：称取中药组合物制剂，用甲醇水溶液超声提取，离心，取上清液，加水，过SPE柱，再用甲醇水溶液洗脱，收集洗脱液，水浴吹干，以甲醇：水复溶，得到样品溶液；B、液相色谱条件：流动相为甲醇和含0.1%甲酸的H2O，流速：0.5ml/min；进样量为10μL；梯度程序：0‑2min，90%含0.1%甲酸的H2O，10%甲醇；2‑13min，90‑60%含0.1%甲酸的H2O，10%‑40%甲醇，13‑19min，60‑30%的含0.1%甲酸的H2O，40%‑70%甲醇，19‑20min，30‑0%含0.1%甲酸的H2O，70%‑100%甲醇；柱温40℃；质谱条件：离子化模式为ESI，正、负离子扫描, 毛细管电压为3.5 kV, CE电压为45 V, 除溶剂气体为氮气, 除溶剂温度为550 ℃, 离子源温度为120℃，MS/MS mode‑10 MS/MS at 80 ms each 50‑1300 m/z，IDA，动态背景扣除开启；循环时间：1 秒；数据处理：PeakView SoftwareTM数据处理软件；C、成分鉴定：将乌头碱类化合物的分子式列表导入数据处理软件中的XIC Manager里，将分子式列表的精确质量数与计算的理论质量数对比筛选出符合的成分，根据二级质谱中的碎片信息分析化合物的裂解方式，鉴别出20种乌头碱类化合物，所述的20种乌头碱类化合物分别为：中乌头原碱、卡马乌头原碱、杰斯乌头碱、乌头原碱、次乌头原碱、附子灵、尼奥灵、塔拉地萨敏、查斯曼丁、14‑乙酰塔拉地萨敏、10‑羟基14‑苯甲酰中乌头原碱、14‑苯甲酰中乌头原碱、乌头碱、14‑苯甲酰乌头原碱、14‑苯甲酰次乌头原碱、14‑苯甲酰去氧乌头原碱、中乌头碱、10‑羟基乌头碱、次乌头碱、去氧乌头碱。