[发明专利]发酵制备赖氨酸盐的方法及其产品

摘要

本发明提供了发酵制备含L‑赖氨酸盐的产品的方法，其包括向产L‑赖氨酸的菌导入一个被认为与赖氨酸代谢无关的基因。另外，本发明还提供了所述方法生产的产品，该产品相对于现有含L‑赖氨酸盐的产品，能够显著提高抗吸湿性，从而适宜长期保存。

主权项

发酵制备含L‑赖氨酸硫酸盐的产品的方法，其包括：（1）将编码氨基酸序列如SEQ ID No：l所示的蛋白的多核苷酸克隆入pET‑20b(+)质粒，然后将该重组质粒导入大肠杆菌菌株W3110(tryA)/pCABD2中，获得产L‑赖氨酸的菌株W3110(tryA)/pCABD2‑sigma；(2)在发酵条件下液体培养步骤(1)获得的菌，并收集培养的上清液；所述发酵条件为：将菌株接入液体LB培养基中振荡培养至OD500达到0.35，以5％的接种量接入赖氨酸发酵培养基中以36℃振荡培养72小时，每升赖氨酸发酵培养基配方为：100g葡萄糖，60g (NH4)2SO4，50g CaCO3，35mL蛋白胨‑B，1g KH2PO4，400mg MgSO4·7H2O，200mg L‑甲硫氨酸，10mg FeSO4·7H2O，8.1mg MnSO4·4H2O，300μg生物素和200μg维生素B1，用Tris‑HCl调节至pH 7；所述上清液中包含如下重量配比的氨基酸：赖氨酸51.5~53.5份；天冬氨酸1.45~1.6份；苏氨酸0.9~1份；丝氨酸0.5~0.6份；谷氨酸2.2~2.6份；甘氨酸0.85~1份；丙氨酸1.3~1.5份；缬氨酸0.85~1份；甲硫氨酸0.35~0.48份；异亮氨酸0.55~0.65份；亮氨酸1.2~1.35份；酪氨酸0.6~0.75份；苯丙氨酸0.6~0.7份；组氨酸0.9~1.05份；和，精氨酸1~1.2份；（3）向步骤(2)获得的上清液中加入硫酸并浓缩，以雾状喷入流化床干燥机内造粒，并将颗粒干燥至含水率小于3％w/w。