[发明专利]动物器官人源化的方法及人-动物嵌合体模型

摘要

本发明涉及一种动物器官人源化的方法，其通过使用高效的DTA作为毒性基因产物，构建DTA‑Cre双转基因动物，植入该双转基因动物体内的人体干细胞，可以发育成人的体细胞，部分或完全替代动物体内原内脏或血液，达到人体细胞部分或完全替代动物体内目标脏器或血液的效果，并且通过使用四环素调控系统调控，可以严密控制毒性DTA的表达。通过上述方法构建的人‑动物嵌合体代替传统的转基因小鼠，操作简便。此外，本发明还涉及一种使用上述动物器官人源化的方法构建得到的人‑动物嵌合体模型。

主权项

1.一种动物器官人源化的方法，其特征在于，包括如下步骤：构建含有DTA基因的转基因动物以及含有Cre基因的转基因动物，其中，所述含有DTA基因的转基因动物的启动子与DTA基因被两个LoxP和一个停止序列隔开，由所述LoxP加上所述停止序列抑制表达，所述含有Cre基因的转基因动物的Cre基因的启动子由转入动物体内特异性启动子启动的四环素依赖的反式作用子启动；将所述含有DTA基因的转基因动物与所述含有Cre基因的转基因动物杂交，并对杂交后代进行基因筛选得到含有Cre基因及DTA基因的双转基因动物；向所述含有Cre基因及DTA基因的双转基因动物体内植入人体干细胞，制得含有人体细胞的双转基因动物；对含有人体细胞的双转基因动物喂食或注射四环素或四环素衍生物，诱导表达Cre，从而介导两个Loxp位点的重组，移除所述停止序列，DTA基因的启动子接近并启动表达DTA基因，杀死动物体内目标细胞，促进人源性细胞的增生，得到人‑动物嵌合体模型。