[发明专利]黄芪愈伤组织和黄芪悬浮细胞的快速繁殖方法无效
| 申请号： | 201310410256.5 | 申请日： | 2013-09-11 |
| 公开（公告）号： | CN103451146A | 公开（公告）日： | 2013-12-18 |
| 发明（设计）人： | 苏刘花 | 申请（专利权）人： | 南京泽朗农业发展有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/04 | 分类号： | C12N5/04;C12N5/02 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 211225 江苏省南*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明研究了一种黄芪愈伤组织和悬浮细胞的快速繁殖方法，包括无菌外植体的获得、愈伤组织的诱导、悬浮细胞培养、稀土调控悬浮细胞中酶的活性及黄酮皂苷的含量等步骤，本发明方法所制备的黄芪悬浮细胞中含有较高含量的黄芪皂苷。本发明方法利用稀土对黄芪悬浮细胞进行有目的的调控，可以在短期内获得大量的制药原料，并能有效降低生产成本。 | ||
| 搜索关键词： | 黄芪 组织 悬浮 细胞 快速 繁殖 方法 | ||
【主权项】：
一种黄芪愈伤组织和悬浮细胞的快速繁殖方法，包括无菌外植体的获得、愈伤组织的诱导、悬浮细胞培养、稀土调控黄芪悬浮细胞中黄酮皂苷的含量，其主要步骤如下：（1）按照植物组织培养常规消毒方法对野外采取的外植体材料进行消毒处理，获得无菌的外植体；（2）将步骤（1）获得的无菌黄芪叶片，芽接种到愈伤组织诱导培养基中进行愈伤组织诱导，诱导出来的愈伤组织接种入增值培养基中进行愈伤组织增值，增值培养4‑5代，获得嫩绿松散的愈伤组织；（3）将步骤（2）获得的嫩绿松散的愈伤组织接种到附加激素0.5‑1.5 mg/L NAA和1‑3 mg/L IBA的MS培养基中进行震荡悬浮培养，培养2‑3代获得黄芪悬浮细胞；（4）将步骤（3）获得的黄芪悬浮细胞接种入MS+ 1mg/LNAA+2mg/LIBA+稀土1‑3mg/L，收集黄芪悬浮细胞称重，然后分两份，一份‑70℃冰箱保存鲜样，一份60℃烘干保存干样。
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