[发明专利]一种利用混合模式层析介质连续分离纯化抗体的方法

摘要

本发明涉及一种利用混合模式层析介质连续吸附分离纯化抗体的方法，具体是一种通过多层析柱串联连续吸附装置分离纯化抗体的方法，属于抗体纯化技术领域。所述连续吸附分离纯化抗体的方法有效解决了现有混合模式层析技术纯化抗体工艺中层析柱的处理能力有限、产品纯度和收率低等问题；在实现抗体分离纯化连续化生产的基础上，同时提高了层析柱的抗体载量以及抗体的收率和纯度。所述混合模式层析介质价格低廉、配基不易脱落，有效地避免了因蛋白A层析介质配基脱落而产生的产品污染、动态吸附容量下降等问题。所述以4-（1-咪唑-基）苯胺为配基的层析介质的制备方法操作简单，成本低廉，所述方法可以使抗体的单柱产能提高2.5倍以上，抗体纯度高于90%。

主权项

一种混合模式层析柱串联连续吸附装置，其特征在于，包括串联设置的n个填充有MEP HyperCel层析介质或者配基密度为10‑120mmol/g的以4（咪唑‑1‑基）苯胺为配基的混合模式层析介质的层析柱，用于从包含抗体和至少一种杂蛋白的生物原料中连续吸附抗体来分离纯化抗体；其中，所述以4（咪唑‑1‑基）苯胺为配基的混合模式层析介质是以平均粒径为20‑270μm的琼脂糖凝胶、纤维素或羟基化甲基丙烯酸亲水聚合物微球为基质，在所述基质表面偶联烯丙基，然后通过烯丙基与N‑溴代琥珀酰亚胺溴代反应得到的活化末端基团偶联4（咪唑‑1‑基）苯胺为配基的层析介质，其结构式为M‑L‑AN；M表示基质，L表示由烯丙基活化引入的短链烷基，AN表示4（咪唑‑1‑基）苯胺。