[发明专利]一种从茶叶籽粕中提取酪氨酸酶抑制剂的方法

摘要

本发明涉及酪氨酸酶抑制剂的提取方法，旨在提供一种从茶叶籽粕中提取酪氨酸酶抑制剂的方法。该方法包括以下步骤：将茶叶籽粕预处理后进行脱脂，然后加入乙醇水溶液提取，离心得到滤渣和提取液；向滤渣中加入缓冲液，进行浸提、超声提取、离心得到提取液；将之前得到的提取液真空浓缩后，萃取得到萃余液，将之后得到的提取液用60%乙醇溶液进行梯度洗脱得到60%乙醇洗脱液；将萃余液和60%乙醇洗脱液混合，浓缩后冷冻干燥得到酪氨酸酶抑制剂。本发明有效提高了目标物的萃取精度，大大提高了提取的效率，可以有效提高茶叶籽粕资源的经济效益，且制备的酪氨酸酶抑制剂是一种天然高效的酪氨酸酶抑制剂，对酪氨酸酶的抑制效果显著。

主权项

一种从茶叶籽粕中提取酪氨酸酶抑制剂的方法，包括粉碎茶叶籽粕，其特征在于，包括以下具体步骤：步骤A：将茶叶籽粕预处理后进行脱脂，以茶叶籽粕和体积浓度95%的乙醇水溶液为1g：15ml～1g：25ml的比例，向脱脂后的茶叶籽粕中加入体积浓度95%的乙醇水溶液，在40～50℃下提取30～40min，然后以12000转/分钟离心20分钟后，得到滤渣和提取液；步骤B：以步骤A得到的滤渣和缓冲液为1g：20ml～1g：30ml的比例，向步骤A得到的滤渣中加入缓冲液，在40～60℃下浸提2～3h，再超声提取10～20min后，以12000转/分钟离心20分钟，得到提取液；所述缓冲液为PH是7～9，且含占脱脂后茶叶籽粕干重3～5%的碱性蛋白酶的缓冲液；步骤C：将步骤A得到的提取液真空浓缩到原体积的1/5～1/15，然后以浓缩后的提取液和氯仿的体积比为1：1的比例，向浓缩后的提取液中加入氯仿进行萃取，得到萃余液；步骤D：将步骤B得到的提取液真空浓缩到原体积的1/5～1/7，过D101大孔树脂进行柱层析，用体积浓度分别为20％、60％和100％的乙醇溶液进行梯度洗脱，洗脱流速为1ml/min，收集60%乙醇洗脱液；步骤E：将步骤C中得到的萃余液和步骤D中得到的60%乙醇洗脱液混合，浓缩后冷冻干燥，即得到从茶叶籽粕中提取酪氨酸酶抑制剂。