[发明专利]一种灵芝融合培养方法

摘要

本发明提供了一种灵芝融合培养方法，该方法经(1)制作试管培养基、(2)制作母种、(3)扩制母种、(4)制作原种、栽培种等工序后，将栽培种植入椴木栽培袋中，在大棚内培养2～3个月，覆土出芝培养45～50天使子实体产生和生长，待子实体长至12cm至15cm时，将子实体顶端细嫩处切去，取栽培种种菌块2至3cm接种到子实体上，用塑料薄膜覆盖5～7天后除去薄膜继续培养，至灵芝菌盖直径达到15cm～20cm，菌盖厚度达到5cm～8cm即可采收；经烘干包装即可上市销售。本发明的灵芝融合培养方法，在培养灵芝过程中，不会产生孢子粉，能够有效的保证灵芝营养成分。

主权项

一种灵芝融合培养方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)制作试管培养基：将PDA培养基或改良PDA培养基用分装器装入试管中，装量为试管长的1/5，塞上棉塞， 置灭菌锅中，在0.15MPa压力下灭菌15min，将试管趁热排放在斜面板上自然冷却；(2)制作母种：在无菌条件下切取灵芝菌蕾其内部菌柄尖端处直径2mm～3mm的组织块，接种到试管培养基上，在26℃～28℃条件下培养25d～35d，至菌丝长满斜面即进行菌丝纯化，制成母种；(3)扩制母种：在无菌条件下将母种以1：6进行转管，置26℃～28℃环境中培养，菌丝满管后，作扩制母种；(4)制作原种：A1、制取培养基料：取木屑、麸皮、石膏、棉籽壳中的几种营养质成分配制成培养 基料；B1、装料灭菌：将培养基料装入原种瓶中，至瓶4/5处，上紧下松，料面压平压实，用生活饮用水洗净瓶身和瓶口，擦干瓶口后，用棉塞封口并包扎牛皮纸，进行灭菌处理；C1、接种：冷却至28℃以下，在无菌条件下接种，每支试管的扩制母种接5瓶～6瓶；D1：培养：将接种的原种瓶放置到培养室中培养39d～42d至菌丝长满瓶，制成原种；培养室内温度控制在26℃～28℃之间，空气相对湿度65％～70％；(5)制作栽培种：A2、制取培养基料：取木屑、麸皮、石膏、棉籽壳中的几种营养质成分配制成培养 基料；B2、装料灭菌：将培养基料装入栽培种袋中，至袋3/5处，上紧下松，料面压平压实，用清水洗净袋身和袋口，擦干袋口后，套好颈圈用棉塞封口并包扎牛皮纸，进行灭菌处理；C2、接种：冷却至28℃以下，在无菌条件下接种，每瓶原种接45袋～50袋；D2：培养：将接种的栽培种袋放置到培养室中培养39d～42d至菌丝长满袋，制成栽培种；培养室内温度控制在26℃～28℃之间，空气相对湿度65％～70％；(6)栽培：(F)菌椴制作：将椴木枝条截段捆扎放入栽培袋中，进行灭菌处理；(G)接种发菌：将经过灭菌处理的栽培袋移入经消毒处理的接种室，将栽培种接入栽培袋中接种培养2～3个月，至椴木外表面全部发满菌丝体；所述培养室温度控制在22℃～28℃之间，空气湿度控制在65～70％之间，光照控制在200～300勒克斯之间，二氧化碳浓度低于1‰；(H)覆土出芝：将发满菌丝体的椴木脱袋放置到大棚中的垄沟中，上面覆土2cm～3cm，培养45～50天，得到子实体；大棚温度控制在25℃～28℃之间，空气湿度控制在80～95％之间，光照控制在2000‑4000勒克斯之间，二氧化碳浓度低于1‰；(I)融接：取栽培种菌块，破碎，用保鲜薄膜包好成型，培养5～7天得到菌丝体，备用；待子实体长至高为12cm～15cm时，将子实体顶端细嫩处切去，取菌丝体菌块2～3cm接种到子实体上，用塑料薄膜覆盖5～7天，待子实体与菌丝体全部融合，去掉塑料薄膜，空气湿度保持在85％～95％，再长40～50天，至灵芝菌盖直径达到15cm～20cm，菌盖厚度达到5cm～8cm，菌丝体全部覆盖整个子实体，孢子粉的营养成分全部留在子实体中，再培养30天左右，待菌盖变红，成熟即可采收；(7)烘干包装。