[发明专利]一种龙爪柳茎的增殖方法

摘要

本发明公开了一种龙爪柳茎的增殖方法，通过植物组织培养的方法以龙爪柳茎为外植体对龙爪柳茎进行增殖，在组织培养中所用培养基包括MS、0.01～1mg/L萘乙酸（NAA）、0.05～2mg/L玉米素、30g/L蔗糖和6.5g/L琼脂粉，根据本发明提供的方法，可快速稳定的对龙爪柳茎进行增殖，操作简单易控，增殖率高。

主权项

1.一种龙爪柳茎的增殖方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）外植体的选取，包括以下子步骤：（1-1）每年4～10月选取龙爪柳当年生嫩茎的形态学上端4～5节，每一节作为一个外植体，冰袋保存；（1-2）将（1-1）中取得的外植体上叶片的形态学上端剪去，保留叶片的形态学下端0.5～1cm；（2）外植体灭菌，包括以下子步骤：（2-1）将（1）处理过的外植体以流动水冲洗；（2-2）将（2-1）中处理后的外植体移至超净工作台中进行以下操作：①用75%酒精对外植体进行表面灭菌30～60s，后用灭菌水冲洗酒精灭菌后的外植体；②在不断摇动的条件下，用0.5～1%次氯酸钠溶液对①处理后的外植体进行灭菌，6～8min；③用灭菌水冲洗经②处理后的外植体；（3）接种、培养，包括以下子步骤：（3-1）将步骤（2）处理后的外植体的形态学下端插入培养基中，每个培养基中接种4个外植体，置于组织培养室中在以下培养条件下培养：温度27℃，光照3000lx，14小时光周期；（3-2）继代培养：（3-1）中接种的外植体约2周后腋芽开始膨大，3～4周后腋芽抽出新叶，5～6周外植体长至3cm长后，继代至与（3-1）中所用培养基配比相同的培养基中进行继代培养，培养3个月左右，外植体长至10～15cm，得到继代龙爪柳茎；（3-3）增殖培养：将（3-2）中继代培养得到的继代龙爪柳茎取出，按照其节数，将每节叶片的形态学上端剪去，保留叶片的形态学下端0.5～1cm，移至与（3-1）中所用培养基配比相同的培养基中进行增殖培养；（4）重复步骤（2）～（3）；其中，所述培养基包括：其中，所述g/L是基于每升培养基所述成分的重量。