[发明专利]在样品中检测靶核酸的方法在审
| 申请号： | 201310501156.3 | 申请日： | 2013-10-22 |
| 公开（公告）号： | CN104561249A | 公开（公告）日： | 2015-04-29 |
| 发明（设计）人： | 许越琰;赵海峰 | 申请（专利权）人： | 常州金麦格生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京汉昊知识产权代理事务所(普通合伙) 11370 | 代理人： | 黄可峻 |
| 地址： | 213000 江苏省常州市武*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种扩增、检测和定量靶核酸的方法，其包括以下步骤：(a)将样品在聚合酶的存在下与一对引物接触，其中所述聚合酶为具有3’-5’外切活性的聚合酶，并且所述一对引物中的至少一个为报告引物，其特征在于：所述报告引物的3’和5’端分别标记了报告基团或淬灭基团，并且所述报告引物的3’端的两个或两个以上核苷酸与靶核酸的序列错配；(b)实施一个或多个循环扩增步骤；(c)测量报告基因的信号，由此对靶核酸进行检测和定量。本发明还提供了用于本发明方法的试剂盒和反应混合物。 | ||
| 搜索关键词： | 样品 检测 核酸 方法 | ||
【主权项】：
一种扩增、检测和定量靶核酸的方法，其包括以下步骤：(a)将样品在聚合酶的存在下与一对引物接触，所述引物与靶核酸的序列可特异性杂交，其中所述聚合酶为具有3’‑5’外切活性的聚合酶，并且所述一对引物中的至少一个为报告引物，其特征在于：所述报告引物的3’和5’端分别标记了报告基团或淬灭基团，所述报告基团的信号被淬灭基团淬灭，并且所述报告引物的3’端的两个或两个以上核苷酸与靶核酸的序列错配，所述报告基团标记在错配的核苷酸上；(b)实施一个或多个循环扩增步骤，所述循环扩增步骤包括杂交步骤和核酸延长步骤，所述杂交步骤包括使由所述引物与靶核酸特异性杂交，所述核酸延长步骤包括在所述聚合酶的催化下,引物延伸和生成自所述靶核酸衍生的扩增产物；(c)测量报告基因的信号，由此对靶核酸进行检测和定量。
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