[发明专利]一种厚壳贻贝多糖部分酸水解化合物及其制备方法与应用

摘要

本发明涉及医药技术领域，本发明提供了一种新的制备我国东海厚壳贻贝多糖类部分酸水解化合物。本发明还提供了该厚壳贻贝多糖部分酸水解化合物的制备方法，以及在制备抗肿瘤药物中的应用。

主权项

1.一种厚壳贻贝多糖部分酸水解化合物，其特征在于，该化合物是根据以下制备方法制备得到的：A.粗制品制备新鲜贻贝软体组织匀浆，1％甲醇间歇搅拌浸泡24h去脂，离心取沉淀；加水煮沸5h，抽滤，残渣重复加水煮沸3h，抽滤，合并滤液；旋转蒸发50℃减压浓缩滤液；0.5％活性炭脱色，离心去沉淀；加乙醇至终浓度75％，4℃静置醇沉过夜；离心收集沉淀，分别用无水乙醇和丙酮洗涤2次，干燥得多糖水提物；多糖水提物溶于水，Sevage法除蛋白，混合液磁力搅拌，分液漏斗静置分层，弃下层有机溶剂相；反复8次，至界面无白色沉淀；旋转蒸发50℃减压浓缩上层水相，加三倍体积无水乙醇沉淀过夜，弃上清，冷冻干燥得粗多糖；B.精制品制备将粗多糖溶于蒸馏水，离心收集上清，不溶物再次热水浴中溶于蒸馏水，离心弃沉淀，合并两次上清液，终浓度0.2g/ml；上DEAE‑Sepharose F.F XK‑50离子交换制备柱，蒸馏水洗脱，自动部分接收器收集洗脱液；苯酚‑硫酸法1:5跟踪检测收集多糖组分，至无糖洗出为止，480nm处测定OD值，绘制洗脱曲线；真空冷冻干燥浓缩多糖洗脱液，得到多糖提取物半纯品；多糖提取物复溶于蒸馏水，离心弃沉淀，浓度0.2g/ml，上Sepharose CL‑6B凝胶制备柱，蒸馏水洗脱，自动部分接收器收集洗脱液，苯酚‑硫酸法跟踪检测收集多糖组分，至无糖洗出为止；重复上Sepharose CL‑6B凝胶制备柱，至HPLC检测呈单一对称峰；真空冷冻干燥得到多糖精制品；C.部分酸水解多糖化合物的制备多糖精制品5mg/ml溶于0.9％NaCI溶液，加浓硫酸至终浓度10％，50℃，水解2h；旋转蒸发50℃减压浓缩水解液，真空冷冻干燥得到。