[发明专利]一种检测血管内皮生长因子C在真核细胞CHO 中的表达方法无效
申请号: | 201310519068.6 | 申请日: | 2013-10-29 |
公开(公告)号: | CN103614460A | 公开(公告)日: | 2014-03-05 |
发明(设计)人: | 王景文 | 申请(专利权)人: | 王景文 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 116000 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明公开了一种检测血管内皮生长因子C在真核细胞CHO中的表达方法。根据人VEGF-CcDNA的序列,设计合成一对特异性引物,用RT-PCR法克隆乳腺癌细胞MCF-7VEGF-C基因的cDNA,回收PCR产物连接于克隆载体。本发明的有益效果是,基因测序能够证实RT-PCR产物包含VEGF-CcDNA全长。重组pcDNA3.1(-)中含有VEGF-CcDNA全长序列,Western-blotting检测到细胞培养上清中以及细胞内有VEGF-C蛋白存在。结论:成功构建了人类VEGF-C真核表达载体并检测到载体在真核细胞中的表达。 | ||
搜索关键词: | 一种 检测 血管 内皮 生长因子 真核细胞 cho 中的 表达 方法 | ||
【主权项】:
一种检测血管内皮生长因子C在真核细胞CHO 中的表达方法,其特征在于,根据人VEGF ‑C cDNA 的序列, 设计合成一对特异性引物, 用RT ‑PCR 法克隆乳腺癌细胞MCF ‑ 7VEGF ‑C 基因的cDNA , 回收PCR 产物连接于克隆载体。
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