[发明专利]快速检测猪嵴病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用

摘要

本发明公开了一种用于检测猪嵴病毒的SYBRGreen 荧光定量试剂盒及应用，该试剂盒含有a)RNA裂解液，b)PrimeScript?RTEnzymeMixI，c)逆转录反应液，d)定量引物F及R，e)SYBR?PremixExTaqII，f)标准阳性模板，g)阴性对照品等。与之前的RT-PCR试剂盒相比，本发明简化了操作步骤，缩短了反应时间，减少了污染几率，并且能够提高检测的准确度和速度，一个样本检测可在3个小时内完成。荧光定量PCR在扩增完成后可以直接通过标准曲线定量起始病毒的拷贝数，能为流行病学提供可靠信息，该试剂盒还可以应用于（抗）猪嵴病毒药物的研究，对生物制品进行定量检测及质量监控；应用前景十分广泛。

主权项

1.一快速定量检测猪嵴病毒的荧光定量PCR试剂盒，试剂盒包括：a)RNA裂解液，b)PrimeScript®RTEnzymeMixI，c)逆转录反应液，d)定量引物F及Re)SYBR®PremixExTaqII，f)ROXReferenceDye,g)标准阳性模板，h)阴性对照品i)无菌双蒸水所述逆转录反应液含有5×PrimeScript®Buffer，OligodTPrimer，Random6mers引物，标准阳性模板是含有猪嵴病毒特异性目的片段的质粒，阴性对照样品由SPF猪粪便样品中提取RNA，经过逆转录获得的cDNA样品，SYBR®PremixExTaqII液含有TaKaRaExTaqHS，dNTPMixture，Mg²+，TliRNaseH，SYBR®GreenI。