[发明专利]一种熊胆粉纯化方法无效
申请号: | 201310523280.X | 申请日: | 2013-10-30 |
公开(公告)号: | CN103520210A | 公开(公告)日: | 2014-01-22 |
发明(设计)人: | 严忠贵;成传英;向泽方 | 申请(专利权)人: | 成都盛源堂生物科技有限公司 |
主分类号: | A61K35/413 | 分类号: | A61K35/413;A61K31/575 |
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地址: | 621000 四川省成*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明涉及一种熊胆粉纯化方法,包括如下顺序进行的步骤:在新鲜提取的熊胆汁中加入聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和无菌蒸馏水,静置澄清,获得的上清液中加入2倍体积的无水乙醇,制得熊胆醇提物并加入大孔硅胶柱子;利用2倍体积75%无水乙醇分3次对硅胶柱子进行洗涤,收集洗涤液并加入到纤维素粉CF11柱子中,涡旋振荡混匀,进行熊胆汁分离,所得上清液,加入1/10体积的3mol/LNaAc和等体积的异丙醇,-20℃沉淀数小时后离心30min,收集沉淀并洗涤,所得沉淀溶于蒸馏水中,制成熊胆溶液,加热至50℃,加入复合蛋白酶进行脱色除腥,超滤膜过滤后,上清液经喷雾干燥后即可获得熊胆粉成品。本发明技术所得熊胆粉,有效含量高,色素含量低,无腥味,药用价值提升。 | ||
搜索关键词: | 一种 熊胆 纯化 方法 | ||
【主权项】:
一种熊胆粉纯化方法,其特征在于,包括如下顺序进行的步骤:(1)在新鲜提取的熊胆汁中加入聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和无菌水蒸馏水,震荡混匀,静置澄清,获得上清液;(2)在步骤(1)中所得上清液中加入2倍体积的无水乙醇,制得熊胆醇提物;(3)将步骤(2)所得熊胆提纯物加入大孔硅胶柱子,利用2倍体积75%无水乙醇分3次对硅胶柱子进行洗涤,收集洗涤液;(4)用无菌蒸馏水对步骤(3)中所得洗涤液进行稀释,使得无水乙醇的浓度为16.5%;(5)将步骤(4)中所得含有16.5%无水乙醇的熊胆汁上清液加入到纤维素粉CF11柱子中,涡旋振荡混匀,进行熊胆汁分离,5000rpm条件下,离心5min,离心结束后,在纤维素粉CF11柱子中加入等体积的无菌蒸馏水,5000rpm条件下,离心5min;(6)收集步骤(5)中所得上清液,加入1/10体积的3mol/L NaAc和等体积的异丙醇,混匀,‑20℃沉淀,沉淀完成后,4℃条件下,12000rpm离心30min,弃上清,收集沉淀;(7)加入75%无水乙醇对步骤(6)中收集的沉淀进行洗涤,洗涤结束后,在4℃环境下,12000rpm离心30min,弃上清,收集沉淀;(8)将步骤(7)中所得沉淀,溶于蒸馏水中,搅拌1至3小时,制成熊胆溶液,调节pH为2至8,加热至50℃并保持该温度,加入复合蛋白酶,酶解结束后,灭酶,进行超滤膜过滤,获得的上清液经喷雾干燥后即可获得熊胆粉成品。
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