[发明专利]一种检测基因突变的引物及其应用有效
申请号: | 201310525078.0 | 申请日: | 2013-10-30 |
公开(公告)号: | CN103710431B | 公开(公告)日: | 2017-04-19 |
发明(设计)人: | 王永忠 | 申请(专利权)人: | 常州市第三人民医院 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 常州市维益专利事务所(普通合伙)32211 | 代理人: | 王凌霄 |
地址: | 213001 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及一种检测基因突变引物及应用,该引物包括锚定序列、嘌呤环和检测序列,锚定序列位于引物5’‑端与靶序列有大于14个碱基互补,嘌呤环为引物3’‑端第5~8个碱基位置由3~4个黄嘌呤核苷、次黄嘌呤核苷或脱氧次黄嘌呤核苷形成泡状环,检测序列位于引物3’‑末端由5~8个碱基组成。本发明的技术方案中由于引物3’‑末端起第5~8个碱基位置插入的泡状环且与靶序列对应位置有“0”或“1”个碱基对位形成泡状环赋予了引物高度特异基因突变检测能力,因此本发明的引物可抑制非特异性扩增,提高了检测能力,可应用于检测低拷贝基因突变检测、多重PCR、基因芯片等领域。 | ||
搜索关键词: | 一种 检测 基因突变 引物 应用 | ||
【主权项】:
一种检测基因突变的引物,其特征在于:该引物包括如下三部分:1)锚定序列:该序列位于引物5’‑端,与靶序列有大于14个碱基配对;2)嘌呤环:引物3’‑端起第5~8个碱基位置插入有3个脱氧次黄嘌呤核苷,与靶序列的同等位置上有“1”个碱基或“0”个碱基对位,形成“3:0”或“3:1”的泡状嘌呤环;3)检测序列:位于引物3’‑末端由5~8个碱基组成的基因突变检测序列;所述引物具有22~30个碱基,引物与靶序列结合的Tm值为40~65℃;检测序列与靶序列结合的碱基个数为5~8;检测序列与靶序列结合的Tm值为10~20℃;检测基因突变的碱基放置在所述检测序列3’‑末端起第“1”、“2”、“3”或“4”个碱基位置。
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