[发明专利]一种纳豆激酶生产方法

摘要

本发明公开了属于微生物技术领域的一种纳豆激酶的生产方法。以大豆粉及玉米淀粉为原料，采用液体发酵技术，发酵罐发酵：发酵温度35-42℃，pH控制在6.8-7.2，纳豆芽孢杆菌接种量为2%-5%，通气量为10-25L/min，发酵时间不超过24h，得到的浓缩液经真空冷冻干燥后得到纳豆激酶粉末。本发明使用的大豆粉和玉米淀粉，原料来源广泛，二者搭配使用保证了菌种的营养需求，而且发酵周期短，不超过24h，发酵液纳豆激酶酶活高，达到30-40万U/mL，能有效的降低生产成本，同时采用的提纯和干燥技术也有利于该生产方法的工业化生产。

主权项

一种纳豆激酶生产方法，该生产方法是将大豆粉和玉米淀粉经纳豆芽孢杆菌液体发酵，发酵液经微滤和超滤进行澄清和浓缩，最后经真空冷冻干燥得到成品纳豆激酶粉末，其特征在于：包括如下步骤：1）液体发酵使用的菌种为纳豆芽孢杆菌，名称为YJND01，分类命名枯草芽孢杆菌（bacillus subtilis），保藏编号为：CGMCC No.7516，保藏日期为2013年4月25日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；2）以大豆粉及玉米淀粉为原料，采用液体发酵技术，在50L发酵罐发酵：料水比1:10‑15，发酵温度35‑42℃，pH控制在6.8‑7.2，纳豆芽孢杆菌接种量为2%‑5%，通气量为10‑25L/min，发酵时间不超过24h，发酵液的纳豆激酶酶活（蚓激酶标准）为30‑40万U/mL；3）将步骤2）得到的发酵液先经过0.2μm的中空纤维膜进行澄清，再用孔径10Kda的中空纤维膜超滤浓缩，浓缩倍数5‑10倍；4）将步骤3）得到的浓缩液经真空冷冻干燥后得到纳豆激酶粉末，该纳豆激酶粉末的酶活力为300‑500万U/g。