[发明专利]利用幼胚拯救技术获得小报春与岩生报春种间杂种的方法

摘要

本发明提供一种利用幼胚拯救技术获得小报春与岩生报春种间杂种的方法，选择原产我国的报春属小报春与岩生报春进行杂交，采用子房培养手段进行幼胚拯救，对获得的后代材料进行杂种形态学鉴定，选择茎、叶、花期、花序等形态学特征介于双亲之间，出现双亲不具有的新的性状的后代材料，即为种间杂交新品种。实现了报春花属种间远缘杂交，获得了一批杂种新种质。

主权项

利用幼胚拯救技术获得小报春与岩生报春种间杂种的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）小报春与岩生报春杂交：利用岩生报春新鲜花粉，以小报春为母本进行人工去雄并套袋隔离，重复授粉2‑3次，将授粉后的小报春置于温室内培养；2）幼胚拯救及杂交后代的获得：取杂交授粉后25‑30d的小报春子房，以75%酒精进行表面消毒后，置于含吐温20的次氯酸钠溶液中灭菌，然后用无菌水冲洗，沥干或吸干表面水分，切开子房取出未成熟的种子接种至培养基I中，于20‑25℃，每日光照10‑12h，光照度1600‑2000lx的条件下进行培养；25‑30d后，将得到的幼苗转接至培养基II中壮苗，于20‑25℃，每日光照10‑12h，光照度1600‑2000lx的条件下进行培养；25‑30d后，将得到的幼苗转接至培养基III中，于20‑25℃，每日光照10‑12h，光照度1600‑2000lx的条件下进行扩繁，即获得小报春与岩生报春杂交后代；3）种间杂种鉴定：对获得的杂交后代进行杂种形态学鉴定，最终获得小报春与岩生报春种间杂种；其中，培养基I为：1/2MS+50g/l蔗糖+0.1mg/l NAA+0.1mg/l6‑BA+6g/l琼脂；培养基II为：1/2MS+30g/l蔗糖+6g/l琼脂；培养基III为：1/2MS+30g/l蔗糖+0.1mg/l NAA+2.0mg/l6‑BA+6g/l琼脂。